血漿中差異microRNAs作為胃癌診斷分子標志物的研究.pdf

1、上海交通大學博士學位論文血漿中差異micrNAs作為胃癌診斷分子標志物的研究姓名：李琛申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：劉炳亞；燕敏；陳雪華；陳雪華；陳軍201105miRNAs的表達。篩選胃癌病人術前與健康對照者間、胃癌病人術前與術后間均有顯著差異的miRNAs進入大樣本的驗證。第三部分：收集胃癌病人180例、胃癌前病變病人20例、結直腸癌病人20例和健康對照志愿者80例的血漿樣本，分別檢測各組中由第二部分篩選出的差異miRNA

2、s在血漿中的表達。分析胃癌病人血漿中miRNAs表達與胃癌臨床病理特點的相關性，利用ROC曲線比較它們對胃癌診斷的AUCs，并與傳統(tǒng)的腫瘤指標比較它們對胃癌判斷的敏感性、特異性和準確性?！窘Y果】在miRNA芯片篩選的959個人類miRNAs中，通過比較胃癌病人和健康對照者血漿中miRNA的表達譜，發(fā)現(xiàn)44個miRNAs有顯著差異，其中37個miRNAs顯著上調，7個miRNAs顯著下調。利用這44個差異miRNAs進行聚類分析，能較好地

3、將胃癌病人和健康對照者區(qū)分開。設定2倍差異表達為cutoff值，差異最顯著的5個上調的miRNAs(miRNA199a3p、miRNA26b、miRNA1515p、let7f和1et7a)和2個下調的miRNAs(miRNA198和miRNA720)進入下一步的定量RTPCR篩選。在5個上調的miRNAs中，與健康對照比較，胃癌病人血漿中miRNA199a3p(P=0002)和miRNA1515p(P=0002)的表達量顯著升高。行胃癌

4、切除術后血漿中miRNA一199a3p和miRNA1515p的表達均較手術前有顯著下降(P005)。而血漿中miRNA一26b(P0615)、let一7f(P=0692)、let7a(P0429)和下調的miRNA198(P=0725)及miRNA720(P=0661)1約表達量在胃癌病人和健康對照組間無顯著差異。因此，篩選出miRNA199a3p和IIliRNA1515p進入下一步的大樣本驗證。大樣本的驗證中，180例胃癌病人血漿中m

5、iRNA199a3p的表達量分別較健康對照者(P0001)，胃癌前病變者(P=0004)和結直腸癌病人(P0004)顯著升高。經單因素分析，胃癌病人血漿中miRNA199a3p的高表達與腫瘤漿膜侵犯(P0001)、N2—3淋巴結轉移(P0014)和StageIII和IV(P=0003)顯著相關。并且，隨著胃癌TNM分期的進展，血漿中miRNA199a3p的表達也相應逐步升高。雖然胃癌病人血漿中miRNA1515p的表達也分別較健康對照者