NT-3在顳葉癲癇后的表達與海馬苔蘚纖維發(fā)芽關(guān)系的研究.pdf

1、【目的】探討神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(neurotrophin-3，NT-3)在大鼠顳葉癲癇(temporal lobe epilepsy，TLE)模型中海馬內(nèi)數(shù)量及變化與異常興奮性環(huán)路的可能關(guān)系，及NT-3在大鼠TLE模型中的作用，為顳葉癲癇發(fā)病機理的研究提供理論依據(jù)。【方法】成年大鼠側(cè)腦室內(nèi)注射紅藻氨酸(kainic acid，KA)誘導(dǎo)建立TLE模型：一、于造模成功后36h時側(cè)腦室注射NT-3正、反義寡核苷酸(antisense olig

2、onucleotide，ASODN)及磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline，PBS)，分別于于造模后2d，4d，7d處死大鼠，取大鼠腦組織海馬采用免疫組化法研究NT-3反義寡核苷酸干預(yù)所致的NT-3蛋白表達變化；二、于造模成功后2d，7d，10d分別三次注射NT-3ASODN、正義寡核苷酸及生理鹽水，第14d處死大鼠取海馬，經(jīng)Neo-Timm銀染后用光鏡和電鏡觀察苔蘚纖維出芽及突觸重建?！窘Y(jié)果】KA致癇后NT-3

3、在海馬齒狀回的表達下降，在7d內(nèi)隨時間的延長而逐漸回升，但仍低于正常水平；2w時大鼠海馬苔蘚纖維明顯粗亂側(cè)枝發(fā)芽；給予NT-3反義寡核苷酸后能有效降低癲癇后NT-3蛋白水平；同時，在相同時間點與其他組相比，NT-3反義寡核苷酸組苔蘚纖維發(fā)芽程度在范圍與密度上表現(xiàn)更高。電鏡觀察各組大鼠齒狀回顆粒細胞層及內(nèi)分子層顯示：正常組大鼠很少見到銀標記突觸末端；NT-3反義寡核苷酸組大鼠在齒狀回內(nèi)分子層可見銀標記突觸末端，標記的銀顆粒主要在突觸間隙或