戊四氮點(diǎn)燃模型大鼠海馬ATF3的表達(dá)變化與苔蘚纖維出芽的關(guān)系.pdf

1、目的：通過觀察戊四氮（pentylenetetrazole; PTZ）大鼠點(diǎn)燃模型海馬CA3區(qū)及齒狀回區(qū)轉(zhuǎn)錄激活因子3(activating transcription factor3;ATF3)的動態(tài)表達(dá)變化，結(jié)合海馬苔蘚纖維出芽(mossy fiber sprouting; MFS)的程度，探討其與MFS的關(guān)系及在癲癇過程中的作用。
　　方法：健康SD雄性成年大鼠150只，隨機(jī)分為生理鹽水對照組（60只）和PTZ實(shí)驗(yàn)組（90只

2、）。實(shí)驗(yàn)組每日腹腔注射PTZ(30mg/kg);同時生理鹽水組注射等量生理鹽水。按照首次腹腔注射后第3天，1周，2周，4周和6周的時間點(diǎn)分配，將PTZ組及生理鹽水組隨機(jī)分為5個亞組。根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法的不同再將每個亞組分為三個小組:第一組用于免疫組化及免疫熒光，檢測各時間點(diǎn)ATF3蛋白在海馬各區(qū)的動態(tài)表達(dá)及在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)定位;第二組用于Western Blot，將海馬各區(qū)ATF3表達(dá)變化進(jìn)行半定量分析;第三組用于Timm染色，檢測苔蘚纖維出芽情

3、況，其中實(shí)驗(yàn)組每小組各6只，對照組每小組各4只。
　　結(jié)果：
　　1.動物行為學(xué)表現(xiàn)
　　大鼠多在連續(xù)注射PTZ21-28天（平均23.7±1.9天）后被點(diǎn)燃。模型點(diǎn)燃率為94.4％，死亡率為5.33％。除了4周和6周組各有一只大鼠未出現(xiàn)癇性發(fā)作外，點(diǎn)燃成功后大鼠出現(xiàn)誘發(fā)發(fā)作及自發(fā)發(fā)作，對照組未出現(xiàn)癇性發(fā)作。
　　2.苔蘚纖維出芽評分
　　實(shí)驗(yàn)組CA3區(qū)與對照組相對應(yīng)時間點(diǎn)相比MFS評分均有顯著性差異（P＜

4、0.05）。從3天起評分逐漸增加，4周時達(dá)高峰，至6周仍維持在較高水平。齒狀回區(qū)MFS評分在實(shí)驗(yàn)組與對照組之間以及各組內(nèi)不同時間點(diǎn)之間比較均無顯著性差異（P＞0.05）。
　　3.ATF3蛋白的動態(tài)表達(dá)
　　免疫組化示在癲癇點(diǎn)燃過程中，實(shí)驗(yàn)組:海馬CA3區(qū)ATF3蛋白表達(dá)逐漸上升，在4周組達(dá)最高峰，6周組稍有下降(P＜0.05);齒狀回區(qū)ATF3蛋白在點(diǎn)燃過程中無明顯變化(P＞0.05)。對照組:海馬CA3區(qū)及齒狀回區(qū)在3天