發(fā)育鼠單次驚厥后NF-κB與N-Cadherin的表達(dá)在海馬苔蘚纖維發(fā)芽中作用的研究.pdf

1、目的：癲癇是神經(jīng)系統(tǒng)的一種常見病，它是一組以反復(fù)發(fā)作性大腦神經(jīng)元異常猝發(fā)放電所致的暫時(shí)性大腦功能失常為特征的慢性疾病。已有研究證實(shí)大鼠每次驚厥發(fā)作均可導(dǎo)致腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生，轉(zhuǎn)錄因子NF-kB參與或促進(jìn)了腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡。我們先期研究表明在癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作后大鼠海馬結(jié)構(gòu)中存在明顯的苔蘚纖維發(fā)芽。因此，本研究的目的希望能夠明確單次癲癇發(fā)作后是否也存在苔蘚纖維發(fā)芽現(xiàn)象，如果有，這種苔蘚纖維發(fā)芽與NF-kB表達(dá)和神經(jīng)性鈣黏附分子(N-Cad

2、herin)是否存在相關(guān)性。 方法：利用腹腔注射戊四氮制作發(fā)育期SD大鼠(14d、28d兩個(gè)日齡組)的單次驚厥發(fā)作模型，驚厥發(fā)作達(dá)Racine標(biāo)準(zhǔn)中V級(jí)發(fā)作。再將各日齡組隨機(jī)分為NS組、致驚組和PDTC預(yù)處理組，分別采用免疫組化法于致驚后24h及致驚后3周觀察NF-kB與N-Cadherin的表達(dá)，HE染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，并利用特異性的Timm染色法于致驚后1周和3周觀察海馬苔蘚纖維發(fā)芽。 結(jié)果：

3、 1．HE染色：NS組海馬切片顯示，神經(jīng)細(xì)胞排列整齊緊密，邊緣清晰，胞漿透明，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，染色質(zhì)分布均勻，核仁清晰，形態(tài)正常；而致驚組可見海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞出現(xiàn)核固縮濃染、染色質(zhì)凝集成塊、邊集、細(xì)胞變小、邊緣欠清晰等特征性凋亡改變。PDTC預(yù)處理組顯示完整的細(xì)胞明顯增多。 2.免疫組化NF-k B染色：NS組大鼠海馬沒有發(fā)現(xiàn)NF-kB p65核轉(zhuǎn)位細(xì)胞，而致驚后24h各日齡組幼鼠腦組織中海馬結(jié)構(gòu)中NF-kB p6

4、5核轉(zhuǎn)位細(xì)胞較NS組明顯增加(P<0.01)，陽性細(xì)胞主要表現(xiàn)為胞漿和胞核均出現(xiàn)棕黃色顆粒；PDTC預(yù)處理后NF-kB p65的核轉(zhuǎn)位細(xì)胞較致驚組明顯減少(P<0.05)，胞漿染色變淡。 3.Timm染色：NS組在海馬CA3區(qū)可見極少Timm染色顆粒，致驚后1周偶見Timm染色顆粒，與NS組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；致驚后3周可見較多Timm染色顆粒沿海馬CA3區(qū)呈條帶樣分布，半定量評(píng)分在2分左右，較NS組明顯增加(

5、P<0.01)；PDTC預(yù)處理組可見Timm染色顆粒較相應(yīng)對(duì)照組明顯減少(P<0.05)； 4.免疫組化N-Cadherin染色：NS組大鼠海馬可見少量的N-Cadherin的陽性細(xì)胞，著色不深；致驚組可見CA3和齒狀回門區(qū)有較多的陽性細(xì)胞，主要表現(xiàn)為胞漿和核膜棕黃色，均勻彌漫染色，與NS組相比明顯增多(P<0.01)；PDTC預(yù)處理組可見N-Cadherin染色陽性細(xì)胞較相應(yīng)對(duì)照組明顯減少(P<0.05)。 結(jié)論：