二氧化碳?xì)飧箤δ[瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)因子nm23-H1及MMP-2在裸鼠卵巢癌移植瘤中表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　 觀察二氧化碳(CO2)氣腹對人卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌細(xì)胞株(SKOV-3)在裸鼠體內(nèi)生長增殖及所形成的卵巢癌移植瘤組織中轉(zhuǎn)移抑制基因(nm23-H1)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2基因（MMP-2）表達(dá)的影響，并分析二者之間的相關(guān)性，以期探討CO2氣腹對腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制，為臨床上腔鏡手術(shù)用于治療卵巢惡性腫瘤提供實驗依據(jù)。
　　 [方法]
　　 采用腹腔注射卵巢癌細(xì)胞株SKOV-3建立裸鼠卵巢癌腹

2、腔移植瘤模型，隨機(jī)分為四組，每組10只裸鼠:單純麻醉對照組(僅麻醉，手術(shù)時間30min)、開腹手術(shù)組(麻醉后開腹，手術(shù)持續(xù)30min)、CO2氣腹0.5h組(麻醉后建立CO2氣腹持續(xù)時間為30min)、CO2氣腹1h組(麻醉后建立CO2氣腹持續(xù)時間為60min)，術(shù)后飼養(yǎng)12周，處死裸鼠，首先觀察四組裸鼠腹腔腫瘤生長情況，然后收集腫瘤組織，采用實時熒光定量PCR(real-time PCR)和免疫組化SP法檢測癌組織中nm23-H1和M

3、MP-2的mRNA和蛋白表達(dá)情況。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示，采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，各組間腫瘤生長情況與基因表達(dá)情況采用卡方檢驗、單因素方差分析(One-way ANOVA)，兩兩比較采用LSD進(jìn)行多重檢驗;相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析和Pearson積差相關(guān)分析方法。
　　 [結(jié)果]
　　 ①裸鼠腹腔腫瘤重量:開腹組與對照組腹腔腫瘤平均重量沒有明顯差異(P＞0.05)，但CO

4、2氣腹0.5h組和1h組明顯高于開腹組或?qū)φ战M，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 ②nm23-H1和MMP-2蛋白表達(dá)結(jié)果:對照組和開腹組nm23-H1和MMP-2的陽性表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);CO2氣腹組nm23-H1的陽性率均低于對照組，而MMP-2的陽性率均高于對照組，且差異都有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);開腹組與CO2氣腹0.5h組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，但與CO

5、2氣腹1h組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);CO2氣腹不同時間nm23-H1和MMP-2的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）;另外，nm23-H1和MMP-2的蛋白表達(dá)水平成負(fù)相關(guān)（r=-0.445，P＜0.01）。
　　 ③nm23-H1和MMP-2的mRNA表達(dá)結(jié)果:對照組和開腹組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，CO2氣腹組nm23-H1的表達(dá)明顯低于對照組和開腹

6、組，而MMP-2的表達(dá)明顯高于對照組和開腹組，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。CO2氣腹不同時間的兩組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。另外，nm23-H1和MMP-2的mRNA表達(dá)水平具有相關(guān)性，成負(fù)相關(guān)(r=-0.984，P＜0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 ①CO2氣腹對人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的生長增殖有促進(jìn)作用，且腫瘤的增殖與CO2氣腹作用時間相關(guān)。
　　 ②C