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文檔簡(jiǎn)介
1、[目的]
觀察二氧化碳(CO2)氣腹對(duì)人卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌細(xì)胞株(SKOV-3)在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)增殖及所形成的卵巢癌移植瘤組織中轉(zhuǎn)移抑制基因(nm23-H1)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2基因(MMP-2)表達(dá)的影響,并分析二者之間的相關(guān)性,以期探討CO2氣腹對(duì)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制,為臨床上腔鏡手術(shù)用于治療卵巢惡性腫瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[方法]
采用腹腔注射卵巢癌細(xì)胞株SKOV-3建立裸鼠卵巢癌腹
2、腔移植瘤模型,隨機(jī)分為四組,每組10只裸鼠:單純麻醉對(duì)照組(僅麻醉,手術(shù)時(shí)間30min)、開腹手術(shù)組(麻醉后開腹,手術(shù)持續(xù)30min)、CO2氣腹0.5h組(麻醉后建立CO2氣腹持續(xù)時(shí)間為30min)、CO2氣腹1h組(麻醉后建立CO2氣腹持續(xù)時(shí)間為60min),術(shù)后飼養(yǎng)12周,處死裸鼠,首先觀察四組裸鼠腹腔腫瘤生長(zhǎng)情況,然后收集腫瘤組織,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PCR)和免疫組化SP法檢測(cè)癌組織中nm23-H1和M
3、MP-2的mRNA和蛋白表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各組間腫瘤生長(zhǎng)情況與基因表達(dá)情況采用卡方檢驗(yàn)、單因素方差分析(One-way ANOVA),兩兩比較采用LSD進(jìn)行多重檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析和Pearson積差相關(guān)分析方法。
[結(jié)果]
①裸鼠腹腔腫瘤重量:開腹組與對(duì)照組腹腔腫瘤平均重量沒有明顯差異(P>0.05),但CO
4、2氣腹0.5h組和1h組明顯高于開腹組或?qū)φ战M,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
②nm23-H1和MMP-2蛋白表達(dá)結(jié)果:對(duì)照組和開腹組nm23-H1和MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);CO2氣腹組nm23-H1的陽(yáng)性率均低于對(duì)照組,而MMP-2的陽(yáng)性率均高于對(duì)照組,且差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);開腹組與CO2氣腹0.5h組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),但與CO
5、2氣腹1h組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);CO2氣腹不同時(shí)間nm23-H1和MMP-2的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);另外,nm23-H1和MMP-2的蛋白表達(dá)水平成負(fù)相關(guān)(r=-0.445,P<0.01)。
③nm23-H1和MMP-2的mRNA表達(dá)結(jié)果:對(duì)照組和開腹組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),CO2氣腹組nm23-H1的表達(dá)明顯低于對(duì)照組和開腹
6、組,而MMP-2的表達(dá)明顯高于對(duì)照組和開腹組,且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。CO2氣腹不同時(shí)間的兩組nm23-H1和MMP-2的表達(dá)有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。另外,nm23-H1和MMP-2的mRNA表達(dá)水平具有相關(guān)性,成負(fù)相關(guān)(r=-0.984,P<0.05)。
[結(jié)論]
①CO2氣腹對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖有促進(jìn)作用,且腫瘤的增殖與CO2氣腹作用時(shí)間相關(guān)。
②C
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