聚乙烯二氨三嗪基氫鍵型基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的細(xì)胞內(nèi)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、基于乙烯基二氨三嗪單體(VDT)和質(zhì)粒DNA(pDNA)的腺嘌呤-胸腺嘧啶堿基對間氫鍵的相互作用,我們實驗室前期成功構(gòu)建了PVDT基新型氫鍵型非病毒轉(zhuǎn)基因載體。在前期實驗的基礎(chǔ)上,本論文中,我們進(jìn)一步考察PVDT基聚合物/pDNA復(fù)合物性質(zhì),瓊脂糖凝膠電泳驗證了載體與pDNA復(fù)合的氫鍵型特征。復(fù)合物的表面電荷和復(fù)合物粒徑測量顯示PVDT基聚合物可以覆蓋pDNA的表面電荷,形成略帶負(fù)電或電中性的復(fù)合物;也發(fā)現(xiàn)隨著復(fù)合比增加,復(fù)合物粒徑先減

2、小再增大,這是由于兩個因素造成的:更多的PVDT基聚合物能夠壓縮pDNA到更加緊密的狀態(tài),中性的復(fù)合物粒子不穩(wěn)定容易相互聚集。在細(xì)胞內(nèi)化攝入的研究中,chlorpromazine和filipin III能夠分別抑制網(wǎng)格蛋白控制的內(nèi)吞作用和細(xì)胞膜穴樣內(nèi)陷控制的內(nèi)吞作用。兩種抑制劑的抑制結(jié)果表明,PVDT基聚合物采用一種非網(wǎng)格蛋白、非細(xì)胞膜穴樣內(nèi)陷控制的內(nèi)吞方式被COS-1細(xì)胞內(nèi)化吸收。對這種內(nèi)吞方式進(jìn)行溫度抑制實驗和動力學(xué)實驗進(jìn)行進(jìn)一步考

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