基于聚乙烯二氨基三嗪的氫鍵型轉(zhuǎn)基因載體.pdf

1、本文研制出一種新型的通過(guò)氫鍵作用于DNA堿基對(duì)以達(dá)到復(fù)合DNA目的非病毒載體。以自由基無(wú)規(guī)聚合的方式制備了聚乙烯二氨基三嗪(PVDT)及其與乙烯基吡咯烷酮(VP)的共聚物，并精制出水溶部分。瓊脂糖凝膠電泳顯示PVDT基聚合物可有效復(fù)合DNA，并通過(guò)氫鍵作用使DNA縮合成密實(shí)狀態(tài)，有效置換溴化乙錠(EB)。隨著DNA的復(fù)合，圓二色譜(CD)發(fā)現(xiàn)DNA構(gòu)象由B型向C型轉(zhuǎn)變，并出現(xiàn)psi型譜線，可能緣于DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)的改變(長(zhǎng)程手性結(jié)構(gòu))。透

2、射電鏡(TEM)下，被PVDT基聚合物縮合的DNA呈現(xiàn)球狀、環(huán)狀或大的聚集體，類似于陽(yáng)離子載體縮合DNA的形態(tài)。以熒光素酶和增強(qiáng)的綠色熒光蛋白報(bào)告基因研究PVDT基載體對(duì)非洲猴。腎(COS-1)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，結(jié)果表明PVDT基載體具有滿意的轉(zhuǎn)染效率，比商品化ExGen 500有著更高的轉(zhuǎn)染活性和更低的細(xì)胞毒性。PVDT基載體可有效保護(hù)DNA免受DNase I的酶解，復(fù)合物在牛血清蛋白(BSA)下仍具有高的穩(wěn)定性。鑒于這些特點(diǎn)，PVDT基載