穿心蓮系列化合物及甘草次酸的生物轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、本文選擇了自然界中含量豐富，結構骨架為半日花烷型二萜的穿心蓮內(nèi)酯類化合物和五環(huán)三萜化合物甘草次酸作為研究對象。這兩類化合物同屬萜類化合物，藥理活性強，具有生物利用度好、毒副作用小等特點，十分適合作為“模型化合物”進行結構修飾和構效關系的研究。 利用微生物和大鼠肝微粒體轉(zhuǎn)化技術，對所選化合物進行了結構修飾，分離并鑒定了轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的結構，測定其抗腫瘤和抗病毒活性，并分析總結了相應的構效關系，從中發(fā)現(xiàn)了結構新穎的活性衍生物；同時，探索了

2、提高轉(zhuǎn)化產(chǎn)率的控制條件和技術參數(shù)，發(fā)現(xiàn)了專一性強、轉(zhuǎn)化率高的定向微生物轉(zhuǎn)化體系，用于大量制備活性衍生物，為尋找有工業(yè)化應用前景的活性先導化合物奠定了基礎。主要工作如下： 1、利用刺孢小克銀漢霉完成了對脫水穿心蓮內(nèi)酯的生物轉(zhuǎn)化。實驗表明刺孢小克銀漢霉對脫水穿心蓮內(nèi)酯的9位碳具有較好的專一性轉(zhuǎn)化。經(jīng)過分離純化得到5個產(chǎn)物，根據(jù)1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等波譜數(shù)據(jù)，鑒定了這5個化合物的結構，其中3個為新化合物。

3、 2、研究了刺孢小克銀漢霉對脫水穿心蓮內(nèi)酯的生物轉(zhuǎn)化動態(tài)。考察了轉(zhuǎn)化時間、加藥量、pH值、酶抑制劑和底物結構對轉(zhuǎn)化反應的影響。當轉(zhuǎn)化時間為72小時，加藥量為20mg/L，pH值為6-8時，主產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率最高。細胞色素P450酶抑制劑強烈抑制主產(chǎn)物的生成。底物結構中11，12位雙鍵和8，17位雙鍵對轉(zhuǎn)化反應有著重要的影響。 3、完成了雅致小克銀漢霉對脫水穿心蓮內(nèi)酯的微生物轉(zhuǎn)化，分離純化得到8個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，其中5個與刺孢小克銀漢霉的轉(zhuǎn)

4、化產(chǎn)物相同，根據(jù)1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等波譜數(shù)據(jù)鑒定了產(chǎn)物的結構，3個為新化合物。測定了轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的抗腫瘤活性，總結了相應的構效關系，并推測了底物的可能代謝途徑。 4、選擇多型孢毛霉和刺囊毛霉對甘草次酸進行了生物轉(zhuǎn)化，共分離純化11個轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，其中3個化合物是首次分離獲得，其結構正在鑒定過程中。刺囊毛霉對甘草次酸有高度的專一性轉(zhuǎn)化能力，主產(chǎn)物7β-羥基甘草次酸的得率達87．5%，可作為生物反應器，大量制備轉(zhuǎn)化產(chǎn)