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文檔簡介
1、目的:通過山柰揮發(fā)油的提取和乳劑制備,觀察其對人胃癌裸鼠原位種植模型和胃癌細胞中多種細胞周期調(diào)控因子的影響,探討其抗胃癌增殖的機制。 方法:運用現(xiàn)代制藥工藝提取山柰揮發(fā)油,并將其制備成穩(wěn)定的乳劑;建立MKN-45人胃癌裸鼠原位種植模型,動物隨機分為生理鹽水組、化療組、山柰揮發(fā)油組、空白對照組和乳劑溶媒對照組,造模后第三天開始給藥:生理鹽水組給予生理鹽水0.5ml每天腹腔注射,6次/周;化療組給予CTX稀釋液0.5ml腹腔注射,劑
2、量為50mg.kg-1.d-1,3/周;山柰揮發(fā)油乳劑組給予山柰揮發(fā)油乳劑0.5ml每天腹腔注射,6次/周;乳劑溶媒對照組給予乳劑溶媒液0.5ml每天腹腔注射,6次/周;空白對照組不用藥。6周后摘取胃癌標本,山柰揮發(fā)油乳劑組和空白對照組行基因芯片檢測,觀察對細胞周期相關(guān)基因表達的影響;觀察各組瘤重、抑瘤率和細胞周期、細胞形態(tài)的改變,用免疫組化、RT-PCR方法檢測COX-2、P53蛋白和mRNA的表達;各組藥物血清培養(yǎng)MKN-45人胃癌
3、細胞,用MTT法和軟瓊脂集落形成實驗觀察對細胞增殖的作用,WesternBlot方法分析COX-2、P53蛋白的表達。 結(jié)果:提取的山柰揮發(fā)油制備成的乳劑經(jīng)檢驗是穩(wěn)定的;并對裸鼠模型胃癌組織生長和胃癌細胞增殖有抑制作用,影響多種細胞周期調(diào)控因子,形成G1期阻滯;在體內(nèi)外可下調(diào)胃癌細胞COX-2、P53mRNA和編碼蛋白的表達。 結(jié)論:山柰揮發(fā)油可制備成穩(wěn)定劑型,對多種細胞周期調(diào)控因子的影響,可能是其抗胃癌增殖的機制之一。
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