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文檔簡介
1、本研究是運用蛋白質(zhì)組學(xué)研究的新技術(shù)—蛋白抗體芯片,動態(tài)檢測卵巢癌患者血清和卵巢癌組織中的蛋白質(zhì)組表達譜,篩選出差異表達蛋白質(zhì),分析異常表達蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能,并與患者的免疫狀態(tài)、女性生殖激素和腫瘤標記物的變化進行比較,探索其間的關(guān)系和規(guī)律。通過多角度、多層面的綜合分析,從整體水平上探討卵巢癌發(fā)生發(fā)展的機理,同時也尋找與卵巢癌相關(guān)或具有特異的生物標志分子,為卵巢癌的早期診斷、評估療效以及判斷預(yù)后提供新的分子標志物,為卵巢癌的治療提供新靶點
2、。研究分為以下五個部分: 第一部分抗體芯片篩選卵巢癌組織的差異表達蛋白 目的:應(yīng)用抗體芯片(含512種細胞重要功能蛋白)在正常卵巢與卵巢癌組織間篩選差異表達蛋白。 結(jié)論:抗體芯片是一種重要而有效的比較蛋白質(zhì)組研究手段,所發(fā)現(xiàn)的異常表達蛋白將有助子研發(fā)卵巢癌診斷標志分子和療效監(jiān)控。找到六個與免疫功能相關(guān)的差異表達蛋白。 第二部分抗體芯片篩選卵巢癌患者術(shù)前血清的差異表達蛋白 目的:應(yīng)用抗體芯片篩選健康
3、婦女與卵巢癌術(shù)前血清間差異表達蛋白,并與組織樣本的抗體芯片結(jié)果進行比較。 結(jié)論:抗體芯片的研究樣品可以是組織,血清等。FADD、RAP1A、TGF-β1、p53和G3BP這五種蛋白質(zhì)在術(shù)前血清和組織中均呈現(xiàn)一致的表達,表明它們在上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。 第三部分卵巢癌患者治療前后血清抗體芯片表達的比較 目的:了解在蛋白質(zhì)表達水平上,腫瘤細胞減滅術(shù)和化療對卵巢癌患者的影響,以及術(shù)前、術(shù)后及全程化療結(jié)束后
4、卵巢癌患者血清蛋白質(zhì)組譜的變化規(guī)律。 結(jié)論:手術(shù)和化療在卵巢癌患者的治療中仍很重要,可能的致病因素逐漸減少。在三組血清芯片中共篩選出11個與細胞增殖凋亡相關(guān)的差異表達蛋白質(zhì),其數(shù)目與治療措施呈負相關(guān)。XPA和Mcm2同步先高后低的異常表達,可能與耐藥或復(fù)發(fā)有關(guān)。 第四部分卵巢癌患者手術(shù)前后及化療前后免疫狀態(tài)及與抗體芯片篩選差異蛋白的關(guān)系 目的:動態(tài)監(jiān)測相關(guān)的機體免疫指標,了解卵巢癌患者在手術(shù)前、手術(shù)后及化療后的免
5、疫狀態(tài),并與患者的血清抗體芯片結(jié)果進行比較,以期發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者的免疫狀態(tài)特點和變化規(guī)律,為患者的免疫治療提供依據(jù)。 結(jié)論:卵巢上皮性癌患者的免疫功能低下,手術(shù)和化療后會加重患者免疫功能低下狀態(tài),應(yīng)引起重視。三組抗體芯片篩選出的與免疫功能相關(guān)的六個差異性蛋白的表達,與患者免疫功能低下的結(jié)果相符。 第五部分卵巢癌患者手術(shù)及化療前后女性生殖激素和CA125的變化及與抗體芯片篩選差異蛋白的關(guān)系 目的:動態(tài)檢測了卵巢癌患者
6、卵巢和垂體分泌的生殖激素以及CA125的水平,了解患者在手術(shù)前、手術(shù)后及全程化療結(jié)束后女性生殖激素的特點和CA125變化,并分別與患者的血清抗體芯片結(jié)果進行比較,以期發(fā)現(xiàn)相關(guān)規(guī)律,為女性生殖激素在上皮性卵巢癌治療中的應(yīng)用以及評估機體內(nèi)卵巢癌細胞的消長提供重要的參考資料。 結(jié)論:卵巢上皮性癌組織可能具有分泌孕激素的功能,而且FSH對卵巢癌細胞的生長可能會有影響。RAP1A、CHGA、BCAR1和GABAbR2是與內(nèi)分泌功能相關(guān)的差
7、異表達蛋白,它們的高表達狀態(tài)說明卵巢癌患者的內(nèi)分泌系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)。共有八個差異表達蛋白可能會成為評估卵巢癌細胞在體內(nèi)的消長情況的新指標。 小結(jié):本課題應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片中最成熟的抗體芯片技術(shù)分別篩選了上皮性卵巢癌組織、患者術(shù)前血清、患者術(shù)后血清和患者化療后血清樣品中的差異表達蛋白。同時動態(tài)檢測患者的免疫功能和狀態(tài),女性生殖激素和CA125水平的變化,并與蛋白質(zhì)芯片結(jié)果進行比較。結(jié)果表明:FADD、RAP1A、TGF-β1、p53和
8、G3BP這五種蛋白在術(shù)前血清組和組織中均呈現(xiàn)一致的表達,表明它們在上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。從三組血清抗體芯片結(jié)果來分析,篩選的差異表達蛋白數(shù)目遞減,隨著治療手段(手術(shù)或化療)的增多,可能的致病因素將逐漸減少。三組共篩選出11個與細胞增殖凋亡相關(guān)的異常表達蛋白質(zhì),其數(shù)目隨治療措施增多而明顯下降,說明手術(shù)和化療在卵巢癌患者的治療中仍很重要。篩選出六個與免疫功能相關(guān)的差異性蛋白的表達,與動態(tài)檢測的卵巢上皮性癌患者免疫功能結(jié)果相符。
9、XPA和Mcm2有同步的先高后低的異常表達,可能與耐藥或復(fù)發(fā)有關(guān)。動態(tài)監(jiān)測免疫結(jié)果表明,卵巢癌患者無論術(shù)前、術(shù)后還是化療后免疫功能均明顯低下低下,應(yīng)及時干預(yù)。RAP1A、CHGA、BCAR1和GABAbR2是與內(nèi)分泌功能相關(guān)的差異表達蛋白,它們的高表達狀態(tài)說明卵巢癌患者的內(nèi)分泌系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)。與CA125水平對照,還篩選出八個差異表達蛋白有可能會成為評估卵巢癌細胞在體內(nèi)的消長情況的新指標??贵w芯片是一種重要而有效的比較蛋白質(zhì)組研究手段
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