黃果茄中生物堿的提取分離、結(jié)構(gòu)剖析及生物活性研究.pdf

1、研究背景： 血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人類健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重大傳染性疾病，自上世紀(jì)90年代末以來(lái)，我國(guó)日本血吸蟲病疫情呈明顯的上升趨勢(shì)。釘螺是日本血吸蟲的唯一中間宿主，因此控制釘螺是血吸蟲病防治的關(guān)鍵技術(shù)之一。氯硝柳胺是WHO唯一推薦的化學(xué)滅螺藥物，由于其存在對(duì)魚毒性大、價(jià)格高等弊病，研發(fā)WHO標(biāo)準(zhǔn)(高效、持久、安全及價(jià)廉)的新型植物滅螺藥物替代氯硝柳胺是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。由于缺乏對(duì)植物滅螺成分單體水平的構(gòu)效關(guān)系、環(huán)境安全及經(jīng)濟(jì)

2、性的同步研究，以致尚未研究出一種符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的植物滅螺藥物。研究的目的和意義： 從資源豐富的黃果茄果實(shí)中提取分離有效的生物堿單體，通過(guò)其結(jié)構(gòu)和生物活性的研究，為創(chuàng)制WHO標(biāo)準(zhǔn)的新型滅螺藥物提供設(shè)計(jì)依據(jù)和物質(zhì)基礎(chǔ)。研究的方法和結(jié)果： SX原粉的生物選擇活性：使用SX原粉依照WHO試驗(yàn)法研究，150μm的90mg·L-1浸泡1h抑螺87.3％；38、23、18及13μm的25mg·L-1浸泡72h滅螺>76.7％；150

3、μm的30mg·L-1浸泡96h斑馬魚死亡10％。結(jié)果說(shuō)明：SX是一種抑滅螺活性高和對(duì)魚毒性低的滅螺植物。 SX生物堿的提取分離和結(jié)構(gòu)剖析：SX原粉經(jīng)95％EtOH水浴浸提和CH3COOCH2CH3萃取、TLC和CCI。層析的分離純化，得到SX-1和SX-2堿性單體，顯微觀察和TLC與HPLC檢測(cè)，其純度分別為97.89％和98.71％；經(jīng)EA、MS、IR、UV-VIS及NMR檢測(cè)分析，SX-1的分子量為883，SX-2的分子量

4、為867，結(jié)構(gòu)解析進(jìn)行中。 SX生物堿的滅螺及抑制其GOT活性：依照WHO試驗(yàn)法研究，20mg·L-1，-SX-1和3mg·L-1 SX-2浸泡72h滅螺均為100％，SX-2滅螺活性顯著高于SX-1；從釘螺軟體組織中制備GOT，在經(jīng)L25(56)確定的最佳反應(yīng)條件(酶濃度0.2 mg·L-1、底物濃度2.5umol·L-1、反應(yīng)時(shí)間15min、反應(yīng)溫度40℃、反應(yīng)體系pH6.0)下，10 mg·L-1和0.625mg·L-1的

5、SX-2對(duì)釘螺GOT活性分別為15.4％(抑制)、-23.3％(誘導(dǎo))。 SX生物堿的抑菌抑癌生長(zhǎng)活性：使用平板抑菌法，50 mg·L-1對(duì)棉花枯萎菌、水稻紋枯菌、黃瓜灰霉菌、小麥赤霍菌、蘋果輪紋菌及棉花炭疽菌4Rh的牛長(zhǎng)抑制率SX-2(21.05、23.38、28.26、28.63、32.08、13.64％)高于SX-1(10.53、23.08、4.35、14.81、24.53、10.82％)；經(jīng)顯微觀察和MTT檢測(cè)，hela