地鱉蟲生物堿的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定及急性毒理研究.pdf

1、地鱉蟲，俗名土鱉蟲，是一種傳統(tǒng)的中藥材，具有散血淤、消堅結(jié)、解凝活血、接骨續(xù)筋、消腫止痛、下乳通經(jīng)等廣泛的藥理活性，早自秦漢時期我國勞動人民就開始用地鱉蟲來預(yù)防和治療疾病。地鱉蟲“味咸、性寒、有微毒”，其毒性和某些藥理活性可能來源于所含的生物堿，但是目前關(guān)于地鱉蟲生物堿的分離提取和藥理活性研究報道很少。為了探明地鱉蟲中所含生物堿的類別和毒性，本文建立了地鱉蟲總生物堿的提取方法，并對提取工藝進行了優(yōu)化，同時對總生物堿進行分離純化，利用現(xiàn)代

2、分析技術(shù)對地鱉蟲生物堿的類別和結(jié)構(gòu)進行了初步研究，此外還對地鱉蟲總生物堿的急性毒性和地鱉蟲及地鱉蟲生物堿粗品中的無機元素進行了分析研究，所得主要結(jié)論歸納如下： 1．地鱉蟲生物堿提取工藝研究 比較了酸水提取法和乙醇提取法提取地鱉蟲總生物堿的得率，結(jié)果表明采取酸水法提取得率較高。通過單因素試驗和正交試驗得出，在影響地鱉蟲總生物堿提取得率的因素中，浸提液pH值和浸提溫度最為顯著，其次是料液比和浸提時間，最佳提取工藝條件為選用p

3、H值2，料液比為l：12（W／v）的稀鹽酸溶液，80℃下提取120min。 2．地鱉蟲生物堿分離純化與鑒定 通過pH值梯度液液萃取、硅膠柱層析、薄層層析等方法對地鱉蟲總生物堿進行分離純化，得到7個生物堿組分，并應(yīng)用紫外掃描、紅外光譜、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用等技術(shù)對其結(jié)構(gòu)進行分析。結(jié)果表明，地鱉蟲中含有多種生物堿成分，其中甾體類生物堿1種，氨基酸衍生物類生物堿3種，哌啶類生物堿2種，其他類生物堿8種。 3．地鱉蟲及其粗生

4、物堿中的無機元素分析 采用ICP-OES法測定了地鱉蟲及其生物堿粗品I中的無機元素，結(jié)果顯示，地鱉蟲及其粗生物堿中均含有豐富的礦物元素鈣、鎂、鐵、鋅，此外還含有微量的有毒元素鉛，經(jīng)過分離后的生物堿粗品I中鉛含量顯著降低。地鱉蟲及其粗生物堿中均未檢出微量有益元素硒。 4．地鱉蟲生物堿提取物急性毒性研究 急性毒性實驗表明，地鱉蟲生物堿提取物對小鼠半數(shù)致死劑量LD<,50>為294.26mg／kg，LD<,50>的95