腺病毒介導(dǎo)NGF對大鼠周圍神經(jīng)損傷的療效研究.pdf

1、目的：構(gòu)建攜帶神經(jīng)生長因子基因序列的5型腺病毒Ad-NGF，并研究Ad-NGF在促進周圍神經(jīng)修復(fù)與再生中的作用。 方法：將NGF基因序列克隆至5型腺病毒穿梭質(zhì)粒pCA13并在HEK-293細胞中包裝出毒得到重組腺病毒Ad-NGF并測序鑒定。將構(gòu)建的重組腺病毒Ad-NGF轉(zhuǎn)染入大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型，使神經(jīng)生長因子在大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型中過表達，并以直接局部注射神經(jīng)生長因子為對照，通過RT-PCR及Western-blot技術(shù)定量檢

2、測大鼠損傷坐骨神經(jīng)中神經(jīng)生長因子mRNA及蛋白的表達、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)、神經(jīng)電生理測定及組織切片病理觀察，評價大鼠損傷坐骨神經(jīng)恢復(fù)的情況。 結(jié)果：序列測定證明NGF序列被成功構(gòu)建到5型腺病毒載體中；Ad-NGF組較之直接局部注射神經(jīng)生長因子組的NGFmRNA及NGF蛋白表達量顯著增多，空腺病毒組及NS陰性對照組的NGF mRNA及NGF蛋白表達量較之前兩者明顯較少(P<0.05)；Ad-NGF組的坐骨神經(jīng)功能指數(shù)及神經(jīng)傳導(dǎo)速度明