軟骨多糖對S180荷瘤小鼠免疫保護作用的研究.pdf

1、本課題以從豬軟骨中提取的短鏈多糖為研究對象,采用小鼠肉瘤S180細(xì)胞分別建立動物腹水瘤模型和實體瘤模型,研究其抗腫瘤免疫保護的作用機制。
　　 建立S180腹水瘤模型,建模5天后開始給藥軟骨多糖治療研究軟骨多糖與小鼠生命延長率關(guān)系,脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的變化。HE染色觀察小鼠脾細(xì)胞的變化。建模后治療并觀察軟骨多糖對S180荷瘤小鼠的細(xì)胞免疫作用。MTT比色法考察軟骨多糖對S180實體荷瘤小鼠免疫系統(tǒng)的影響,分別測量ConA和LPS刺

2、激下小鼠脾細(xì)胞和外周血淋巴增殖情況,發(fā)現(xiàn)其能夠不同程度的提高小鼠的T細(xì)胞和B細(xì)胞刺激指數(shù)。NK細(xì)胞殺傷活性實驗和E花環(huán)形成實驗表明軟骨多糖能提高外周血NK細(xì)胞和脾NK細(xì)胞的活性,及外周血單個核細(xì)胞E花環(huán)形成率。脾細(xì)胞涂片的免疫熒光檢測得到跨膜糖蛋白CD40和CD40L的表達(dá)水平也有一定程度的上調(diào)。流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測淋巴細(xì)胞亞群的變化,軟骨多糖能使CD3+、CD4+細(xì)胞及CD4+/CD8+細(xì)胞比值明顯升高,從而達(dá)到調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞亞群的

3、比例,起到調(diào)整細(xì)胞免疫功能的作用,使機體的免疫調(diào)節(jié)功能得到進一步改善。巨噬細(xì)胞吞噬實驗表明軟骨多糖能提高巨噬細(xì)胞吞噬中性紅和雞紅細(xì)胞的能力,血細(xì)胞染色說明軟骨多糖能提高外周血中性粒細(xì)胞(PMN)的數(shù)量,從而起到抗腫瘤的作用。
　　 軟骨多糖對荷瘤小鼠體液免疫的作用:單向瓊脂擴散免疫實驗發(fā)現(xiàn),在軟骨多糖的作用下,荷瘤小鼠分泌的抗體IgG抗體明顯增加,增強體液免疫效應(yīng),有助于腫瘤免疫。用ABC-EI,ISA法測定小鼠外周血細(xì)胞因子的