抑瘤寧對S180小鼠的抗癌作用及其對細(xì)胞生長周期的影響.pdf

1、目的：惡性腫瘤已成現(xiàn)今危害人類健康的常見病、多發(fā)病，在對惡性腫瘤的治療方面經(jīng)歷了漫長的探索過程，西方醫(yī)學(xué)從外科手術(shù)遵循“整塊”廣泛的根治術(shù)原則，認(rèn)為切除越廣，根治越徹底，療效也越好，到現(xiàn)今的向組織及功能保存的轉(zhuǎn)化，于是發(fā)展了手術(shù)方案個(gè)體化、微創(chuàng)外科、移植修復(fù)外科、預(yù)防性手術(shù)。內(nèi)科也從自氮芥問世以來，研究開發(fā)的大量相對非特異的細(xì)胞毒藥物，和對于細(xì)胞周期不同階段的癌細(xì)胞輪番加以殺傷，轉(zhuǎn)向了靶向性治療，有單克隆抗體、腫瘤疫苗、抗血管生成藥物、

2、抗氧乏細(xì)胞毒藥物、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化凋亡、抗信號(hào)傳導(dǎo)治療、基因治療等。放射治療也無例外地從應(yīng)用單一的電離輻射造成多細(xì)胞損傷轉(zhuǎn)向聯(lián)合性治療，使其適應(yīng)性增加、療效提高而對正常的組織損傷減小。作為中國的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在惡性腫瘤的治療方面，也從扶正的觀點(diǎn)即改善預(yù)后向祛邪的方向發(fā)展即抑制腫瘤細(xì)胞生長和誘導(dǎo)其凋亡。中藥材的價(jià)格低廉、毒副作用小也是不可忽視的因素，抑瘤寧就是在此基礎(chǔ)上研制的。它對消化系統(tǒng)腫瘤的治療有令人矚目的效果，尤其是食管癌、賁門、胃底癌、

3、肝癌、胰腺癌等。療效確切，長期服用無明顯肝、腎、心毒性及骨髓抑制。與化療聯(lián)合應(yīng)用具有增效，減輕機(jī)體毒副反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。
　　 抑瘤寧是由冬凌草、刺五加、龍葵和蛇莓組成，體外實(shí)驗(yàn)表明：能明顯地抑制人食管癌Eca—109細(xì)胞、人胃癌SGC—7901細(xì)胞、人胰腺癌BBxpc—3細(xì)胞和人肝癌Bel—7402細(xì)胞、人乳腺癌MDA—MB—231細(xì)胞、人肺癌NCI—H520細(xì)胞、人肺癌A549細(xì)胞、人宮頸癌Hela細(xì)胞的生長。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明：能抑制

4、小鼠S180實(shí)體瘤的生長、延長S180腹水瘤小鼠的生存期，抑瘤機(jī)制可能與下調(diào)TOPO—Ⅱ(拓?fù)洚悩?gòu)酶—Ⅱ)的表達(dá)有關(guān)。同時(shí)對荷EC—9706裸鼠有明顯的抑瘤作用，通過改變腫瘤細(xì)胞cox—2(內(nèi)環(huán)氧合酶—2)及ki—67(細(xì)胞核相關(guān)抗原)的表達(dá)，抑制腫瘤血管生成，從而抑制腫瘤生長。
　　 本課題進(jìn)行了抑瘤寧的急性毒性實(shí)驗(yàn)，并通過對小鼠S180實(shí)體瘤及腹水瘤的實(shí)驗(yàn)及其對細(xì)胞生長周期影響的研究，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　

5、方法：急性毒性試驗(yàn)：預(yù)實(shí)驗(yàn)：給小鼠經(jīng)口灌胃，按照500g生藥/kg(最小全不致死量)、250g生藥/kg、167g生藥/kg、125g生藥/kg、100g生藥/kg(最大全存活量)的梯度給藥，各劑量組動(dòng)物均為6只，雌雄各半，直至全部存活，觀察藥物的毒性反應(yīng)2周。正式實(shí)驗(yàn)：根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果100g生藥/kg，再對20只雌雄各半的小鼠經(jīng)口灌胃給藥，觀察藥物的毒性反應(yīng)2周。
　　 藥效學(xué)試驗(yàn)：建立昆明小鼠S180實(shí)體瘤及腹水瘤模型，將

6、雄性小鼠隨機(jī)分成5組，每組8只：空白對照組(等容量無菌生理鹽水，ig，1次/d)；陽性對照組(實(shí)體瘤用環(huán)磷酰胺20mg/kg，ig，1次/d；腹水瘤用絲裂霉素0．2mg/kg，ip，1次/d)：抑瘤寧低、中、高劑量組(提取物分別為7．47g生藥/kg，14．94g生藥/kg，22．41g生藥/kg，ig，1次/d)。實(shí)體瘤實(shí)驗(yàn)組均連續(xù)灌胃10d，觀察各組小鼠的瘤重變化及一般情況。實(shí)體瘤各組第11天處死動(dòng)物，取出瘤體稱重，計(jì)算抑瘤率。腹水

7、瘤各組均連續(xù)灌胃10天，其后觀察各動(dòng)物的死亡時(shí)間，計(jì)算生命延長率。
　　 機(jī)理探討：將瘤體制作細(xì)胞懸液，流式細(xì)胞儀分折DNA含量分布，multicycle軟件分析G1、S、G2各期細(xì)胞比例。
　　 結(jié)果：抑瘤寧的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果為100g生藥/kg(體重)，相當(dāng)于臨床用藥量的120．5倍。陽性對照組及抑瘤寧低、中、高劑量組的抑瘤率分別為64．15％、33．49％、35．38％、39．62％，與空白對照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

8、；抑瘤寧三個(gè)劑量組問隨著劑量的增大抑瘤效果越來越明顯，呈量效關(guān)系；各組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)體重都高于初始體重。抑瘤寧高劑量組的生命延長率為23．53％，與空白對照組比較，雖有差異但無實(shí)際意義。抑瘤寧低、中劑量組的生命延長率分別是6．86％、14．71％，與空白對照組比較，差異均無顯著性。抑瘤寧低、中、高劑量組S期比例分別為52．226％、58．206％、59．004％，與模型對照組比較，差異均有顯著性。
　　 結(jié)論：
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