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文檔簡介
1、目的:本研究選取益氣活血中藥(黃芪多糖和三七總皂苷)干預(yù)哮喘小鼠模型的氣道重建。通過觀察對(duì)哮喘小鼠氣道壁結(jié)構(gòu)改變、支氣管周圍炎癥細(xì)胞浸潤程度、以及TGF-β1和Ⅲ型膠原表達(dá)的影響,探討益氣活血中藥對(duì)哮喘小鼠氣道重建的阻斷作用及可能的作用機(jī)制,并比較兩種藥物單獨(dú)或聯(lián)合使用效果有無差異。為臨床用藥提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:BALB/C小鼠60只,隨機(jī)分為6組。除正常組外各組用雞卵清蛋白(OVA)腹腔致敏3次,霧化激發(fā)4周
2、建立哮喘模型。地塞米松組和藥物干預(yù)組(益氣活血中藥合用及單獨(dú)使用,共3組)于霧化前30分鐘按組分別腹腔注射不同藥物。正常組用生理鹽水代替OVA和干預(yù)藥物。取材后常規(guī)石蠟包埋肺組織、HE染色。測(cè)定并計(jì)算出氣道壁總面積、氣道壁厚度,用氣道基底膜周徑(Pbm)為分母標(biāo)準(zhǔn)化。半定量評(píng)定支氣管周圍炎癥細(xì)胞浸潤程度。用免疫組化技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和Ⅲ型膠原的定位及表達(dá)水平(用吸光度A表示)。比較各組小鼠氣道炎癥和重建的程度。<
3、br> 結(jié)果:行為學(xué)觀察:致敏小鼠霧化激發(fā)后出現(xiàn)呼吸加快、打噴嚏、口周發(fā)紺、煩躁不安等表現(xiàn)。哮喘模型組最明顯,藥物干預(yù)組較模型組要輕。病理學(xué)觀察:HE染色切片顯示哮喘模型組支氣管發(fā)生明顯改變:氣道壁增厚,上皮壞死脫落,平滑肌層和基底膜層增厚,有大量炎性細(xì)胞浸潤。地塞米松組病理改變程度較輕。三七總皂苷組和其他藥物干預(yù)組表現(xiàn)介于模型組和地塞米松組之間。正常對(duì)照組無明顯病理改變。圖象分析顯示哮喘模型組氣管壁總面積/Pbm、氣管壁厚度/P
4、bm、支氣管周圍炎癥細(xì)胞浸潤程度均較正常組明顯增加(P<0.01),藥物干預(yù)組(D~F組)與正常對(duì)照組和哮喘模型組比較均有差異(P<0.05)。免疫組化檢測(cè):TGF-β1主要表達(dá)在氣道黏膜上皮層。Ⅲ型膠原主要分布于氣道黏膜下層和黏膜上皮細(xì)胞之間。圖象分析顯示哮喘模型組TGF-β1和Ⅲ型膠原吸光度(A)均較正常組明顯增加(P<0.01),地塞米松組和藥物干預(yù)組(C~F組)與正常對(duì)照組和哮喘模型組比較均有差異(P<0.05)。
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