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文檔簡介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)研究以缺血性中風(fēng)最常見的臨床證型為依據(jù),選擇相應(yīng)的三種不同治法及其代表方藥,作用于局灶性腦缺血再灌注大鼠模型;通過對腦組織SDH、Na+-K+-ATPase、CK-BB、AQP-4進(jìn)行檢測分析,動(dòng)態(tài)比較三種中醫(yī)治法及其代表方藥對腦缺血再灌注三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)腦組織能量代謝及水腫的影響,以期尋求缺血性中風(fēng)急性期不同時(shí)間點(diǎn)的最佳中醫(yī)治法,為臨床上缺血性中風(fēng)的中醫(yī)藥的辨證論治提供科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:健康Wistar大鼠240
2、只,雌雄各半,隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、益氣活血組、潛陽熄風(fēng)組和化痰通腑組,每組48只,三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)各16只。采用線栓阻塞大鼠大腦中動(dòng)脈法制作局灶性腦缺血再灌注模型,分別觀察益氣活血法、潛陽熄風(fēng)法、化痰通腑法三種中醫(yī)治法對腦缺血2h再灌注24h、48h和72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的療效。采用密度離心及差速離心法提取腦組織線粒體用于SDH活性測定,采用化學(xué)比色法測定腦組織勻漿Na+-K+-ATPase、CK-BB活性。腦組織AQP-4的檢測采用免
3、疫組織化學(xué)染色法,采用南京捷達(dá)801系列形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)分析統(tǒng)計(jì)AQP-4表達(dá)的陽性面積和平均光密度。數(shù)據(jù)采用方差分析,兩組間比較用t檢驗(yàn)。 結(jié)果:⑴在缺血2h再灌注24h、48h、72h,模型組檢測的腦組織SDH、Na+-K+-ATPase活性明顯降低,CK-BB活性明顯升高,AQP-4表達(dá)明顯增多,符合腦缺血再灌注損傷的病理變化,且與假手術(shù)組比較有顯著性意義。⑵在缺血2h再灌注24h:各治療組與模型組比較,檢測的各項(xiàng)指標(biāo)(
4、SDH、Na+-K+-ATPase、CK-BB、AQP-4)均有顯著性差異;各治療組組間比較提示,化痰通腑組在升高SDH活性及減少AQP-4表達(dá)方面,優(yōu)于益氣活血組和潛陽熄風(fēng)組;潛陽熄風(fēng)組在升高Na+-K+-ATPase和降低CK-BB活性方面,優(yōu)于益氣活血組和化痰通腑組。⑶在缺血2h再灌注48h:各治療組與模型組比較,檢測的各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性差異;各治療組組間比較,益氣活血組在升高Na+-K+-ATPase活性和減少AQP-4的表達(dá)方
5、面,優(yōu)于化痰通腑組和潛陽熄風(fēng)組。⑷在缺血2h再灌注72h:各治療組與模型組比較,檢測的各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性差異;各治療組組間比較,益氣活血組在升高Na+-K+-ATPase及降低CK-BB活性、減少AQP-4的表達(dá)方面,優(yōu)于潛陽熄風(fēng)組和化痰通腑組。 結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)檢測的各項(xiàng)指標(biāo)的變化符合腦缺血損傷的病理生理變化規(guī)律,揭示腦缺血損傷是一個(gè)動(dòng)態(tài)多環(huán)節(jié)的病理反應(yīng)過程,中醫(yī)藥能夠從多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮治療效用。(2)各中醫(yī)治法的最佳作用
6、時(shí)間位點(diǎn)和環(huán)節(jié)為:潛陽熄風(fēng)法,在缺血2h再灌注24h,升高Na+-K+-ATPase和降低CK-BB活性方面最為顯著。化痰通腑法,在缺血2h再灌注24h,升高SDH活性及減少AQP-4的表達(dá)方面最為顯著。益氣活血法,在缺血2h再灌注48h、72h,升高Na+-K+-ATPase及減少AQP-4的表達(dá)方面最為顯著;同時(shí),在缺血2h再灌注72h,降低CK-BB活性方面最為顯著。 (3) 三種中醫(yī)治法均能通過調(diào)節(jié)相關(guān)酶活性及蛋白質(zhì)表達(dá)等干預(yù)機(jī)
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