BMP2、VEGF165雙基因修飾的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合人工骨的體內(nèi)誘導(dǎo)成骨.pdf

1、目的：觀察骨形成蛋白2(BMP2)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(VEGF165)雙基因轉(zhuǎn)染的小鼠骨髄間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合自固化磷酸鈣人工骨后的異位誘導(dǎo)成骨能力。
　　方法：全骨髓貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)原代小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，傳到第3-4代后在脂質(zhì)體2000介導(dǎo)下將真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-BMP2-VEGF165導(dǎo)入小鼠骨髄間充質(zhì)干細(xì)胞，以轉(zhuǎn)染空白質(zhì)粒作為陰性對(duì)照。用免疫組織化學(xué)方法觀察BMP2和VEGF165兩種基因在小鼠骨髄間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)的表

2、達(dá);以自固化磷酸鈣人工骨為支架，建立真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-BMP2-VEGF165雙基因修飾的組織工程骨植入小鼠右側(cè)股骨肌袋內(nèi)；將復(fù)合轉(zhuǎn)染空白質(zhì)粒小鼠骨髄間充質(zhì)干細(xì)胞的自固化磷酸鈣人工骨植入小鼠左側(cè)股骨肌袋內(nèi)。術(shù)后第3天、第2、4、6周進(jìn)行X線攝影對(duì)比，術(shù)后第2、4、6周分別處死小鼠，取肌袋內(nèi)組織行病理切片染色，觀察成骨情況。
　　結(jié)果：小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在轉(zhuǎn)染BMP2、VEGF165后有顯著的相關(guān)蛋白的表達(dá)，由真核表達(dá)質(zhì)粒p