馬爾尼菲青霉菌廣西竹鼠寄生株與臨床人分離株超微形態(tài)學(xué)及氧化形態(tài)特性的研究.pdf

1、目的:通過(guò)觀察雙相型馬爾尼菲青霉菌(PM)臨床人分離株及廣西銀星竹鼠寄生株超微結(jié)構(gòu)；以及體外用H202處理前后觀察PM超微結(jié)構(gòu)的變化，探討不同來(lái)源的PM菌株的形態(tài)學(xué)特征以及抵御氧化殺傷后超微結(jié)構(gòu)變化。 方法:臨床人分離株及廣西銀星竹鼠寄生株P(guān)M25℃和37℃兩種溫度培養(yǎng)7天，光學(xué)顯微鏡下觀察PM菌體特征及透射電子顯微鏡觀察PM超微結(jié)構(gòu)；以含過(guò)氧化氫的培養(yǎng)基對(duì)臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M25℃和37℃兩種溫度培養(yǎng)7天，觀察光學(xué)顯微

2、鏡下PM菌體特征及透射電子顯微鏡下PM超微結(jié)構(gòu)，觀察變化。 結(jié)果:①臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M正常情況下25℃生長(zhǎng)均為菌絲相，有玫瑰紅色素產(chǎn)生，氣生菌絲、營(yíng)養(yǎng)菌絲均豐富；37℃均為酵母型白色菌落，膜樣。加H2O2處理后，臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M菌絲相及酵母相生長(zhǎng)速度均較正常時(shí)生長(zhǎng)緩慢，25℃菌絲相色素產(chǎn)生均較正常時(shí)增加，其中竹鼠寄生株P(guān)M營(yíng)養(yǎng)菌絲較氣生菌絲豐富，而臨床人分離株?duì)I養(yǎng)氣生菌絲無(wú)明顯差別；37℃I臨床人分離株及竹

3、鼠寄生株P(guān)M菌落外觀差別不明顯。②光鏡下，臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M正常生長(zhǎng)時(shí)25℃均有分枝分隔菌絲，分生孢子梗、頂端單輪或雙輪帚狀枝；37℃同樣可見(jiàn)圓形、橢圓形、酵母樣細(xì)胞及關(guān)節(jié)孢子。加H202處理后，臨床人分離株在25℃培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)孢減少，部份菌絲及帚狀枝變形，而竹鼠寄生株P(guān)M加H2O2后光學(xué)顯微鏡下未見(jiàn)有何差別；37℃人、竹鼠PM加H2O2后光學(xué)顯微鏡下見(jiàn)菌體皺縮。③透射電子顯微鏡觀察可見(jiàn)：正常情況下臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M25

4、℃均可見(jiàn)細(xì)胞壁光滑，細(xì)胞膜完整，胞質(zhì)內(nèi)可有細(xì)胞核，線(xiàn)粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，脂質(zhì)體，大小不等的空泡等結(jié)構(gòu)；37℃除可見(jiàn)25℃所見(jiàn)細(xì)胞器外還可見(jiàn)微體結(jié)構(gòu)。H2O2處理后，兩菌株兩相溫度下透射電鏡均可見(jiàn)細(xì)胞壁不完整，局部有缺損，厚薄不均；細(xì)胞膜不連續(xù)，有皺縮及凸起；胞質(zhì)不均勻，吞噬現(xiàn)象明顯，線(xiàn)粒體(Mi)結(jié)構(gòu)改變，其中37℃與25℃相比仍可見(jiàn)較多微體結(jié)構(gòu)。其中臨床人分離株25℃細(xì)胞器結(jié)構(gòu)不清晰，37℃細(xì)胞核N無(wú)核膜，看到凋亡，變化均較竹鼠寄生株明顯。

5、 結(jié)論:①臨床人分離株及竹鼠寄生菌株P(guān)M，兩菌株間比較在雙相溫度下光鏡和電鏡觀察形態(tài)學(xué)無(wú)明顯差別。②兩菌株任一株菌雙相間有改變，電鏡下37℃酵母相見(jiàn)微體結(jié)構(gòu)而25℃菌絲相未觀察到。③過(guò)氧化氫作用后，兩菌株25℃生長(zhǎng)均出現(xiàn)抑制，但玫瑰紅色素產(chǎn)生增加，超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)變化，細(xì)胞壁(CW)不完整，線(xiàn)粒體(Mi)變性；37℃見(jiàn)變性的線(xiàn)粒體，微體結(jié)構(gòu)，吞噬現(xiàn)象明顯。④PM在37℃有可能通過(guò)微體(Mb)溶解機(jī)體衰老細(xì)胞器形成吞噬泡以及調(diào)節(jié)線(xiàn)粒體