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1、目的:初步探討馬爾尼菲青霉菌(Penicillium mameffei,PM)竹鼠寄生株和人感染株中GasC基因表達(dá)變化情況。 方法:隨機(jī)選取15株成年竹鼠體內(nèi)分離PM和15株人感染株P(guān)M在SDA液基25℃震蕩培養(yǎng)72h。采Trizol法提取PM菌株的總RNA。熒光定量PCR技術(shù)測(cè)出兩種不同來(lái)源的菌株GasC基因的表達(dá)量。統(tǒng)計(jì)分析兩種不同來(lái)源的菌株GasC基因的表達(dá)量是否具有差異性。 結(jié)果: ①15只成年廣西野生
2、銀星竹鼠自然攜帶PM陽(yáng)性率100%,30株菌株經(jīng)在SDA液基25℃震蕩培養(yǎng)72h后均產(chǎn)可溶性紅色色素,但有程度差別,即色價(jià)不同。統(tǒng)計(jì)分析兩種不同來(lái)源的PM在25℃時(shí)產(chǎn)色無(wú)差異(p>O.05)。 ②30株菌株提取RNA并逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,經(jīng)PCR后電泳可見(jiàn)GasC基因的目的條帶。 ③采用熒光定量PCR測(cè)出15株竹鼠寄生株P(guān)M和15株人感染株P(guān)M GasC基因的表達(dá)量,SPSS統(tǒng)計(jì)分析組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p)0.05)。
3、 ④菌株的色價(jià)與GasC基因的表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),且色素色價(jià)越高,其菌株GasC基因表達(dá)水平就越高。 結(jié)論:兩種不同來(lái)源的PM25℃時(shí)產(chǎn)色無(wú)差異;GasC基因在 PM 寄生株和人感染株均有表達(dá),其表達(dá)量不存在差異,提示兩組PM菌株在活力和致病力上可能不存在差異;菌株色價(jià)與GasC基因的表達(dá)相關(guān),色素色價(jià)越高,其菌株GasC基因表達(dá)水平就越高,但分泌色素多且GasC基因表達(dá)高的菌株致病力是否較強(qiáng),需進(jìn)一步動(dòng)物
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