結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞的初步研究.pdf

1、目的：檢測(cè)結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620中是否存在SP細(xì)胞(side population cells)，若存在則測(cè)定其比例，使SP細(xì)胞中尋找結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞成為可能；利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620中是否存在CD133+的細(xì)胞亞群，若存在則使用免疫磁珠篩選CD133+的細(xì)胞亞群，再通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)免疫磁珠篩選后陽(yáng)性與陰性細(xì)胞之中的CD133+細(xì)胞比例的變化，探討使用免疫磁珠篩選CD133+細(xì)胞在結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞研究中的可行性。

2、 方法：本研究第一部分是在結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620細(xì)胞懸液加入Hoechst 33342和PI，然后在對(duì)照組加入維拉帕米，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)SP細(xì)胞的表達(dá)，檢測(cè)結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620中SP細(xì)胞比例。第二部分是利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620中是否存在CD133+的細(xì)胞亞群，若存在則使用免疫磁珠篩選CD133+的細(xì)胞亞群，再通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)免疫磁珠篩選后陽(yáng)性與陰性細(xì)胞之中的CD133+細(xì)胞比例。 結(jié)果：（

3、一）結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620中存在SP細(xì)胞，所占比例為0.1～1.0％。（二）結(jié)腸癌細(xì)胞株SW-620中CD133+細(xì)胞所占比例為55.16％左右。經(jīng)免疫磁珠篩選后，CD133陽(yáng)性細(xì)胞群體中CD133+細(xì)胞所占的比例為75.60±6.89％，CD133陰性細(xì)胞群體中CD133+細(xì)胞所占的比例為33.40±3.74％。 結(jié)論：（一）人結(jié)腸癌細(xì)胞系SW-620中確實(shí)有SP細(xì)胞存在，從SP細(xì)胞中尋找結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞的研究方法是可行的。