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文檔簡介
1、目的:對支氣管異物患兒下呼吸道分泌物和咽拭子標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)和多重PCR檢測,以了解支氣管異物患兒下呼吸道細(xì)菌病原的特點;同時比較了分離培養(yǎng)和多重PCR檢測兩種方法的優(yōu)缺點,探討其在下呼吸道感染診斷中的應(yīng)用價值。
方法:使用纖維支氣管鏡或硬質(zhì)支氣管鏡獲取66例支氣管異物患兒的下呼吸道分泌物標(biāo)本,并對所獲得的標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合下呼吸道感染病原譜,在分離培養(yǎng)的同時,確定四種病原菌行基因檢測,針對金黃色葡萄球菌的
2、耐熱核酸酶基因(nuc)、肺炎鏈球菌編碼自溶素特異的LytA基因、流感嗜血桿菌的16SrRNA基因、肺炎克雷白桿菌的16-23SrRNA基因間隔區(qū)設(shè)計特異性引物進(jìn)行多重PCR檢測。分離培養(yǎng)的同時,采用無菌棉拭子涂擦咽后壁獲取咽拭子標(biāo)本病并進(jìn)行培養(yǎng)。
結(jié)果:66例患兒下呼吸道分泌物標(biāo)本培養(yǎng)陽性17例(占25.8%),其中金黃色葡萄球菌6例,肺炎克雷白桿菌3例,白假絲酵母菌2例,C群鏈球菌1例,微球菌1例,陰溝腸桿菌1例,大腸
3、桿菌1例,鮑氏不動桿菌1例,泛菌屬1例;咽拭子標(biāo)本培養(yǎng)陽性7例,其中金黃色葡萄球菌3例,肺炎克雷白桿菌2例,凝固酶陰性葡萄球菌1例,C群鏈球菌1例;通過該多重PCR方法實現(xiàn)了對金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷白桿菌的同時檢測,對14例患兒采用常規(guī)分離培養(yǎng)的方法檢出金黃色葡萄球菌2株,肺炎克雷白桿菌1株,未檢出流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌。多重PCR方法檢測標(biāo)本結(jié)果為金黃色葡萄球菌3株,肺炎鏈球菌4株,流感嗜血桿菌7株,肺炎
4、克雷白桿菌2株。
結(jié)論:1.支氣管異物患兒下呼吸道分泌物培養(yǎng)以革蘭陽性菌為主,占52.9%(9/17),其中金黃色葡萄球菌占66.7%,咽拭子培養(yǎng)結(jié)果與之并不一致,提示下呼吸道分泌物對確定下呼吸道感染細(xì)菌病原可能更有價值;
2.多重PCR檢測表明:支氣管異物患兒下呼吸道分泌物標(biāo)本中,流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌的陽性率較高,且存在混合感染的現(xiàn)象;
3.在支氣管異物患兒的下呼吸道病原菌的診斷中,多重P
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