雞Ⅱ型膠原建立豚鼠自身免疫性內(nèi)耳病的實驗研究.pdf

1、背景與目的:為了明確Ⅱ型膠原是否在AIED發(fā)病中起關(guān)鍵作用,以及研究模型建立初期ICAM-1的表達(dá)情況,該實驗用雞Ⅱ型膠原建立豚鼠自身免疫性內(nèi)耳病模型,用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察模型建立初期ICAM-1的表達(dá)情況,并從功能、形態(tài)方面評價動物模型的內(nèi)耳損傷情況.材料與方法:選用耳廓反射靈敏,體重150-200克純白紅目豚鼠65只,雌雄不限,隨機(jī)分為以下三組:Ⅰ組:對照組(10只,20耳),不施加任何因素,與Ⅲ組相同時間點各處死5只;Ⅱ組:佐劑

2、組(15只,死亡1只,28耳),首次皮下注射完全弗氏佐劑(complete Freundadjuvant,CFA)0.1ml,以后每周皮下注射1次0.1ml不完全弗氏佐劑(incomplete Freundadjuvant,IFA),共注射6次,分別于末次注射后第3天和2周處死7只;Ⅲ組:實驗組(40只,死亡3只),首次皮下注射雞Ⅱ型膠原(400μ g)與CFA的乳濁液0.1ml,以后每周皮下注射1次雞Ⅱ型膠原(200μ g)與IFA的

3、乳濁液0.1ml,共注射6次,末次注射后3天和2周分別處死19只、18只.各組動物均在處死前測定ABR.測試每只豚鼠兩耳的ABR閾值、各波潛伏期及Ⅰ-Ⅲ波波間期,以70 dBSPL刺激強(qiáng)度所得出的各測試參量進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析.處死后Ⅰ組和Ⅱ組均用2只(4耳)作掃描電鏡觀察,Ⅲ組用5只(10耳)作掃描電鏡觀察,剩余動物內(nèi)耳作石蠟包塊供免疫組織化學(xué)測ICAM-1的表達(dá)以及HE染色觀察.實驗數(shù)據(jù)用SPSS10.0軟件處理.結(jié)論:1.雞Ⅱ型膠原可以