2個(gè)家族性腺瘤性息肉病家系A(chǔ)PC基因E15突變檢測(cè).pdf

1、目的：家族性腺瘤性息肉病((Familial adenomatous polyposis,FAP)以結(jié)直腸超過100枚腺瘤性息肉為主要特點(diǎn)。部分患者可并發(fā)硬纖維瘤、上消化道息肉、甲狀腺癌、壺腹周圍癌等大腸外腫瘤。如果不加治療,其惡變率幾乎達(dá)到100％。遺傳性FAP表現(xiàn)為常染色體延遲顯性遺傳,患者的子女發(fā)病率約1/2。基因診斷FAP患者,并對(duì)其親屬進(jìn)行致病基因篩查,可以早期發(fā)現(xiàn)癥狀前患者及攜帶者,進(jìn)行重點(diǎn)監(jiān)控,早期治療,對(duì)降低本病的死亡率

2、具有重要意義。目前認(rèn)為APC基因突變是結(jié)直腸腫瘤發(fā)生過程中的早期事件。APC基因是一種腫瘤抑制基因,該基因可發(fā)生胚系(germline)突變或體細(xì)胞(somatic)突變,胚系突變是FAP的重要遺傳基礎(chǔ)。APC基因突變形式主要為缺失、插入、點(diǎn)突變、重復(fù)或終止密碼突變,60％以上的突變發(fā)生在APC基因的第15外顯子。我國(guó)FAP患者APC基因胚系突變的相關(guān)報(bào)道少見,對(duì)其開展廣泛而深入的研究,對(duì)于探討FAP的發(fā)病機(jī)制、建立有效的監(jiān)控系統(tǒng)、降低

3、該病發(fā)病率和死亡率具有重要意義。本文檢測(cè)2個(gè)FAP家系中患者及親屬APC基因第15外顯子突變,為探討FAP的分子機(jī)制、評(píng)估APC基因突變?cè)贔AP基因診斷、預(yù)測(cè)生存率方面的價(jià)值提供資料。
　　方法：2006年10月~12月,共調(diào)查了來自河南的2個(gè)FAP家系,2個(gè)家系同意檢測(cè)并取得知情同意。抽取9例患者和24例表型正常的血緣親屬為實(shí)驗(yàn)組,1例散發(fā)型FAP患者和2例隨機(jī)健康人作為對(duì)照組,兩組均為漢族,性別、年齡相匹配。2％EDTA-K2

4、抗凝,酚-氯仿法提取基因組DNA,利用PCR-SSCP篩選APC基因第15外顯子,可疑突變片段與部分對(duì)照擴(kuò)增產(chǎn)物送中科院基因研究所純化并測(cè)序。
　　結(jié)果：電泳結(jié)果顯示,對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組各PCR擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小均與預(yù)期目標(biāo)一致,實(shí)驗(yàn)組DNA電泳條帶與對(duì)照組相比未發(fā)現(xiàn)可疑片段。每組均隨機(jī)取3個(gè)位點(diǎn)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行DNA測(cè)序,結(jié)果未見異常。 結(jié)論：(1)本文檢測(cè)來自2個(gè)家系的FAP患者APC基因第15號(hào)外顯子,未發(fā)現(xiàn)突變。(2) AP