人巨細(xì)胞病毒在顱咽管瘤中的感染、表達(dá)及意義.pdf

1、人巨細(xì)胞病毒(HCMV)是一種β皰疹病毒。近年來的研究顯示在人類多種類型腫瘤組織中存在HCMV感染和病毒基因表達(dá),并可能與腫瘤的惡性程度有關(guān),這提示HCMV感染可能在人類某些類型腫瘤的形成和發(fā)展過程中扮演著重要的角色,有可能是一種新的人類腫瘤相關(guān)病毒。HCMV基因產(chǎn)物可通過多種細(xì)胞信號(hào)通路抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移,也能促進(jìn)微血管的生成及血管壁的損害,并形成獨(dú)特的免疫逃避機(jī)制躲避機(jī)體的免疫反應(yīng)。深入研究HCMV感染與腫瘤的病

2、因?qū)W關(guān)系及其作用機(jī)制,可為腫瘤的臨床防治提供新思路。
　　顱咽管瘤是兒童和青少年最常見的顱內(nèi)先天性腫瘤,約占顱內(nèi)腫瘤的4％。顱咽管瘤的臨床表現(xiàn)通常復(fù)雜且嚴(yán)重,治療很棘手,手術(shù)往往難以徹底切除,放化療效果較為有限,腫瘤復(fù)發(fā)率高,預(yù)后差。目前有關(guān)顱咽管瘤的病因?qū)W和發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,這也是臨床上缺乏有效防治方法的一個(gè)重要因素。HCMV感染是否與其發(fā)生有關(guān),國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。
　　本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化方法和real-timePCR

3、方法分別檢測(cè)顱咽管瘤組織和正常腦組織中HCMV抗原表達(dá)情況和基因含量水平,分析HCMV感染與顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展及臨床特征的相關(guān)性。
　　第一部分顱咽管瘤組織中人巨細(xì)胞病毒抗原表達(dá)的檢測(cè)
　　1.方法:
　　2006年6月至2010年12月在西京醫(yī)院神經(jīng)外科行手術(shù)切除且經(jīng)病理確診為顱咽管瘤的患者89例,及行顱內(nèi)高壓造瘺手術(shù)部分切除的正常腦組織10例。以上手術(shù)均由有豐富經(jīng)驗(yàn)的術(shù)者完成,在手術(shù)中收取適量標(biāo)本,迅速放入足量甲醛溶

4、液中固定;充分固定后,石蠟包埋,切片厚4μm,二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色,蘇木素復(fù)染,檢測(cè)HCMV立刻早期蛋白1-72和磷酸化糖蛋白65抗體的表達(dá)情況,進(jìn)而探討HCMV感染與顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　2.結(jié)果:
　　1.HCMV抗原在顱咽管瘤和正常人腦組織中的表達(dá)
　　HCMVIE1-72和pp65抗原在顱咽管瘤細(xì)胞的胞漿和胞核中都有棕黃色或棕褐色均質(zhì)顆粒,在腫瘤組織上皮細(xì)胞中呈不均勻分布。顱咽管瘤組織中HCMVI

5、E1-72和pp65抗原陽性率分別為77.5%和84.3%,而正常人腦組織全為陰性。HCMVIE1-72和pp65抗原表達(dá)陽性率在顱咽管瘤組織和正常人腦組織之間均有顯著性差異(χ2=22.045,P=0.000;χ2=30.324,P=0.000)。
　　2.HCMV抗原表達(dá)與顱咽管瘤臨床病理學(xué)特征的關(guān)系
　　HCMVIE1-72抗原在牙釉質(zhì)型和鱗狀乳頭型顱咽管瘤組織中陽性率分別為83.6%和67.6%,pp65抗原在牙釉質(zhì)

6、型和鱗狀乳頭型顱咽管瘤組織中陽性率分別為89.1%和76.5%;兩抗原在牙釉質(zhì)型顱咽管瘤組織中的陽性率均略高于鱗狀乳頭型,但差異均無顯著性(χ2=2.234,P=0.135;χ2=1.662,P=0.197)。IE1-72抗原男性陽性率為81.6%,女性為72.5%;pp65抗原男性陽性率為81.6%,女性為87.5%;IE1-72和pp65兩抗原陽性率在性別間有差異,但差異無顯著性(χ2=0.595,P=0.440;χ2=0.215,

7、P=0.643),IE1-72和pp65兩抗原陽性率與患者年齡亦無明顯相關(guān)性(r=0.009,P=0.930;r=0.056,P=0.599)。
　　3.結(jié)論:
　　1.顱咽管瘤組織中HCMV抗原表達(dá)陽性率顯著高于正常腦組織,提示HCMV感染可能是一個(gè)誘發(fā)顱咽管瘤發(fā)生的重要病因,并有可能促進(jìn)腫瘤的演變。這對(duì)于臨床預(yù)防和治療顱咽管瘤有一定的啟示作用。
　　2.HCMV抗原表達(dá)陽性率在牙釉質(zhì)型和鱗狀乳頭型顱咽管瘤組織間差異

8、無顯著性,但牙釉質(zhì)型略高于鱗狀乳頭型,仍提示HCMV感染可能與顱咽管瘤的不同病理組織類型發(fā)生及演變有關(guān);在男女性別間有差異,但無顯著性,這與HCMV感染流行病學(xué)特征女性感染率高于男性不一致,可能與本組樣本量較小及實(shí)驗(yàn)方法有關(guān),也可能顱咽管瘤組織HCMV抗原表達(dá)與性別有一定關(guān)系。其致病機(jī)理需要進(jìn)一步研究。
　　第二部分人巨細(xì)胞病毒基因在顱咽管瘤組織中的定量檢測(cè)
　　1.方法:
　　在擬診為顱咽管瘤的患者進(jìn)行手術(shù)的過程中收

9、集適量新鮮的病變組織,立即放入液態(tài)氮中冷凍,然后存于—80℃冰箱中備用。手術(shù)均由有豐富經(jīng)驗(yàn)的術(shù)者完成。以病理報(bào)告為主要依據(jù),排除非顱咽管瘤的標(biāo)本,完全囊變組織標(biāo)本和全鈣化組織標(biāo)本,共收集9例。定量檢測(cè)HCMV基因在顱咽管瘤組織中的含量,進(jìn)一步明確HCMV感染與顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　2.結(jié)果:
　　9例組織中HCMV基因定量全為陰性,但其中1例有陽性趨勢(shì),提示HCMV核酸有可能存在于顱咽管瘤組織中,但含量甚微,以至難以