嗜線蟲致病桿菌對小菜蛾作用方式及殺蟲機理的研究.pdf

1、嗜線蟲致病桿菌(Xenorhabdus nematophila)HB310菌株是從河北省土壤中分離的小卷蛾斯氏線蟲(Steinernema carpocaposae)腸道內(nèi)所分離到的共生細菌，該菌株對多種昆蟲具有口服殺蟲活性。為探索該菌株直接作為殺蟲制劑應(yīng)用于生產(chǎn)的可行性，本研究以蔬菜上重要害蟲--小菜蛾為主要試蟲，研究了HB310菌液及其殺蟲蛋白對小菜蛾的作用方式，同時研究了殺蟲蛋白對小菜蛾和棉鈴蟲幼蟲的作用機理，為共生菌的開發(fā)利用奠

2、定良好的理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下： 1．通過對昆蟲作用方式的研究發(fā)現(xiàn)，HB310菌液及其殺蟲蛋白對小菜蛾幼蟲的殺蟲作用方式主要是胃毒作用和拒食作用，沒有觸殺作用，對成蟲產(chǎn)卵也沒有明顯趨避作用。嗜線蟲致病桿菌HB310原菌液對小菜蛾幼蟲具有較強的胃毒殺蟲活性，72h小菜蛾2，3，4齡幼蟲的校正死亡率分別達到100％，54.39％，50％；殺蟲蛋白粗提物對小菜蛾2齡幼蟲的LC<,50>為0.0461 mg/L；經(jīng)native-PA

3、GE進一步純化得到的毒素Ⅱ(51.9 μg/mL)對小菜蛾2齡幼蟲具有較高的口服胃毒活性，72h幼蟲死亡率達73.33％；用亞致死劑量的菌液及其殺蟲蛋白粗提物處理小菜蛾2齡幼蟲，存活幼蟲的化蛹率、蛹重、羽化率、雌蟲壽命以及成蟲產(chǎn)卵量均明顯下降。 2．HB310菌液既能顯著降低小菜蛾幼蟲的孵化率又能顯著降低初孵幼蟲的存活率，使幼蟲的孵化率降低37％，初孵幼蟲的存活率僅為55％；殺蟲蛋白粗提物對幼蟲的孵化率沒有明顯的影響，僅能顯著降

4、低初孵幼蟲的存活率。 3．對小菜蛾幼蟲中腸主要蛋白酶活性的測定結(jié)果表明，毒素Ⅱ能明顯抑制小菜蛾2齡幼蟲中腸主要蛋白酶(弱堿性類胰蛋白酶、強堿性類胰蛋白酶和類胰凝乳蛋白酶)活性，隨取食毒素Ⅱ時間的增加，小菜蛾幼蟲體內(nèi)主要蛋白酶活性被抑制的程度逐漸增加；另外，毒素Ⅱ的劑量也影響著其對以上蛋白酶抑制作用的程度，隨毒素Ⅱ劑量的增加，幾種蛋白酶被抑制的程度增強。毒素Ⅱ?qū)γ掴徬x幼蟲中腸內(nèi)主要蛋白酶活性有類似的影響。 4．毒素Ⅱ能激活