葡萄風(fēng)信子植株再生體系研究.pdf

1、葡萄風(fēng)信子是一種從歐洲引進(jìn)的鱗莖類優(yōu)良觀賞花卉。本文以葡萄風(fēng)信子的鱗片、葉片和花芽為外植體，通過器官發(fā)生和體細(xì)胞胚胎發(fā)生兩種形態(tài)發(fā)生方式，研究了葡萄風(fēng)信子在組織培養(yǎng)條件下，不定芽的誘導(dǎo)、分化、伸長(zhǎng)及生根，以及胚性愈傷和體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)。主要結(jié)果如下： 以葡萄風(fēng)信子的鱗片為外植體的實(shí)驗(yàn)中，采用了三組不同的培養(yǎng)基。研究結(jié)果表明：鱗片是非常適合器官發(fā)生的外植體，在直接器官發(fā)生和間接器官發(fā)生途徑上均得到了再生植株。其中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因素影響

2、顯著。單獨(dú)添加低濃度BA的MS培養(yǎng)基上，能誘導(dǎo)出少量體積小、生長(zhǎng)緩慢的不定芽。高濃度的IBA和BA組合非常適合不定芽的誘導(dǎo)，于MS+IBA 2.0 mg/L+BA 2.0 mg/L培養(yǎng)基上最早獲得了不定芽，最高誘導(dǎo)率可達(dá)到80％，且以MS+IBA 5.0 mg/L+BA 5.0mg/L培養(yǎng)基上的鱗片產(chǎn)生不定芽數(shù)量為最多。含有0.1 mg/L或0.2 mg/L 2，4-D和1.0 mg/L BA的MS培養(yǎng)基先誘導(dǎo)出了淡綠色、致密的愈傷組織

3、，進(jìn)而從愈傷上得到了不定芽，為間接器官發(fā)生形式。不定芽在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天左右可形成不定根，在根長(zhǎng)2cm時(shí)打開培養(yǎng)瓶煉苗3～5天即可進(jìn)行移栽。實(shí)驗(yàn)中將鱗片切割成上、中、下三個(gè)部分，在含有IBA和BA的MS培養(yǎng)基上得出誘導(dǎo)鱗片分化不定芽的最佳部位為中部，其次是下部，上部為最差。 兩種不同器官發(fā)生方式還出現(xiàn)在以葉片和花芽為外植體的研究中。不同的培養(yǎng)基誘導(dǎo)率也各不相同?；ㄍ泻突üＶ饕灾苯悠鞴侔l(fā)生的方式產(chǎn)生不定芽，在MS+2，4-

4、D 0.1 mg/L+BA 1.0 mg/L培養(yǎng)基上兩者的誘導(dǎo)率均為100％。MS+IBA5.0 mg/L+BA 5.0 mg/L組合能使77.8％花梗直接產(chǎn)生不定芽，而花托在此培養(yǎng)基上的的誘導(dǎo)率只有8.6％，卻在MS+IBA 3.0 mg/L+BA 3.0 mg/L上得到了100％的誘導(dǎo)率。其他部位如花瓣、子房和葉片均先產(chǎn)生淡黃色的愈傷組織，進(jìn)而誘導(dǎo)出不定芽。MS+2，4-D 0.1 mg/L+BA 1.0 mg/L和MS+IBA 3

5、.0 mg/L+BA3.0 mg/L最適合愈傷組織的誘導(dǎo)。 以葉片為外植體置于不同的培養(yǎng)基上還能通過體細(xì)胞胚胎發(fā)生方式獲得葡萄風(fēng)信子的體細(xì)胞胚。誘導(dǎo)愈傷的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA 0.5 mg/L+BA1.0mg/L。在此培養(yǎng)基中，葉片的愈傷誘導(dǎo)率為100％。并且得到淡黃色結(jié)節(jié)狀愈傷和白色透明易碎狀兩種不同形態(tài)的愈傷組織，其中白色透明易碎狀愈傷組織是具有胚性的。將胚性愈傷接種于同種新鮮培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)。一段時(shí)間后，即可觀察到