葡萄風(fēng)信子早花遺傳轉(zhuǎn)化體系建立.pdf

1、葡萄風(fēng)信子屬天門冬科葡萄風(fēng)信子屬（Muscari Miller），藍(lán)色花豐富，是研究單子葉藍(lán)色花形成機(jī)理的理想材料，但其種內(nèi)倍性不穩(wěn)定、童期長(zhǎng)（3年）為研究帶來很多困難。本研究對(duì)6種葡萄風(fēng)信子倍性進(jìn)行鑒定，并從體外成花和早花基因兩方面研究，以期為葡萄風(fēng)信子花色基因研究篩選出合適的材料，縮短葡萄風(fēng)信子童期，為后期葡萄風(fēng)信子的品種選育工作提供參考。主要研究結(jié)果如下:
　　1.6種葡萄風(fēng)信子倍性鑒定
　　選取葡萄風(fēng)信子亞美尼亞M.

2、armeniacum（鈷藍(lán)色），‘海洋的魔法’M.aucheri'OceanMagic'（粉藍(lán)色），‘黑眼睛’M armeniacum‘Dark Eyes’（正藍(lán)色），葡萄風(fēng)信子蔚藍(lán)M.azureum（天藍(lán)帶白條紋），‘白色麗人’M.aucheri‘White beauty’（白色）和‘日出’M.'Pink Surprise'（粉色），6種不同花色的葡萄風(fēng)信子用流式細(xì)胞儀進(jìn)行倍性鑒定。結(jié)果顯示葡萄風(fēng)信子蔚藍(lán)、‘黑眼睛’、‘日出’為二倍體

3、，‘白麗人’、‘海洋的魔法’為三倍體，葡萄風(fēng)信子亞美尼亞為四倍體。
　　2.葡萄風(fēng)信子體外誘導(dǎo)成花研究
　　以葡萄風(fēng)信子亞美尼亞、蔚藍(lán)、‘白色麗人’的花葶、花梗、花蕾、花被、花藥為外植體，設(shè)置不同激素濃度、不同花發(fā)育時(shí)期進(jìn)行誘導(dǎo)。結(jié)果顯示，只有葡萄風(fēng)信子亞美尼亞花蕾外植體誘導(dǎo)出花芽，后長(zhǎng)出花被片。其他兩種葡萄風(fēng)信子的外植體（花被片、花葶、花梗和花藥）只能觀察到愈傷組織和營(yíng)養(yǎng)芽。花芽最適培養(yǎng)基6-BA濃度為2 mg·L-1，只

4、有轉(zhuǎn)色期花苞外植體能有誘導(dǎo)出花芽并長(zhǎng)出花被片。
　　3.早花基因轉(zhuǎn)化葡萄風(fēng)信子
　　從擬南芥克隆早花基因AtFT、 AtSOC1，同時(shí)從葡萄風(fēng)信子亞美尼亞中克隆同源SOC1基因MaSOC1，全長(zhǎng)630bp，實(shí)時(shí)定量結(jié)果表明MaSOC1在在花苞未著色的發(fā)育前期(Sl-S2)，MaSOC1表達(dá)量升高，其中S2時(shí)期（花苞著色前期）表達(dá)量最高，當(dāng)花苞開始進(jìn)入著色期并逐漸開放(S3-S5)后，MaSOC1表達(dá)量逐漸下降，同時(shí)在葡萄風(fēng)信