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文檔簡介
1、[目的]:
1.了解不同濃度(S)-克唑替尼((S)-crizotinib)對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3增殖的影響。
2.了解不同濃度(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3凋亡的影響。
3.了解(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3細胞周期的影響。
4.初步探討(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3發(fā)揮抗腫瘤作用的可能機制。
[方
2、法]:
1.采用CCK-8比色法檢測不同濃度(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3的細胞增殖活性抑制作用,倒置光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化。
2.采用Hoechst33258染色法,倒置熒光顯微鏡觀察不同濃度(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3細胞凋亡的影響。
3.碘化丙啶染色流式細胞技術(shù)檢測(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3細胞周期分布的影響。
3、 [結(jié)果]:
1.隨著(S)-克唑替尼濃度的增加,胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3的細胞存活率明顯降低,在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量相關(guān)性;(S)-克唑替尼作用48小時對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3半數(shù)有效抑制濃度(IC50)分別為29.25uM、17.58uM;50uM(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3具有明顯的殺傷作用,細胞存活率<10%。倒置光學(xué)顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)隨著(S)-克唑替尼濃度的增加,胰腺
4、癌細胞PANC-1和BXPC-3細胞總數(shù)量逐漸減少,形態(tài)欠規(guī)則,死細胞數(shù)目逐漸增加。
2.不同濃度(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3作用48小時,倒置熒光顯微鏡觀察細胞核呈現(xiàn)致密濃染或成碎塊致密濃染的細胞凋亡形態(tài),隨著(S)-克唑替尼濃度增高,細胞凋亡逐漸增多。
3.(S)-克唑替尼10uM作用于胰腺癌PANC-1、BXPC-3細胞48小時,細胞周期G0/G1期比例明顯升高(P<0.05),S期則
5、明顯下降(P<0.05),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,而且10uM(S)-克唑替尼能誘導(dǎo)胰腺癌細胞BXPC-3亞二倍體凋亡細胞比例明顯增加(P<0.05)。
[結(jié)論]:
1.(S)-克唑替尼對胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3具有增殖抑制作用,這一抑制作用在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量相關(guān)性。
2.(S)-克唑替尼能誘導(dǎo)胰腺癌細胞PANC-1和BXPC-3發(fā)生細胞凋亡。
3.(S)-克唑替尼可改變胰腺癌細胞PA
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