（5-羥基-4-氧代-4H-苯并吡喃-3-基）-苯甲酰腙誘導人肝癌細胞周期停滯及凋亡的機制研究.pdf

1、目的：探討新型黃酮化合物(5-羥基-4-氧代-4H-苯并吡喃-3-基)-苯甲酰腙((5-hydroxy-4-oxo-4H-chromene-3-yl)-benzoyl-hydrazone，L1b)對人肝癌細胞HepG2細胞周期調控及誘導凋亡的機制。 方法：不同濃度L1b處理HepG2細胞16、24、32、48小時后，用SRB法測定其對細胞增殖抑制作用，計算IC<,50>值；集落形成試驗測定克隆形成率；相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)的改變

2、；瓊脂糖凝膠電泳檢測L1b對HepG2細胞DNA的損傷作用；PI染色后，用流式細胞儀檢測L1b對HepG2細胞周期的影響；熒光顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察L1b誘導HepG2細胞凋亡狀況；Western blot檢測L1b對胞內MDM2、P53、P21蛋白的變化。 結果：L1b能抑制HepG2和L02細胞的增殖，且呈濃度依賴關系，24小時后對HepG2和L02兩種細胞的IC<,50>值分別為109.67μg/ml和90.38μg/

3、ml，但對兩種細胞抑制增殖作用差別不大；L1b能造成HepG2細胞克隆形成能力下降，最高濃度作用24小時后，HepG2細胞克隆形成率下降到到3.7﹪，與正常對照組比較差異顯著(p<0.01)；相差顯微鏡觀察L1b體外能使HepG2細胞收縮、失去固有形態(tài)；熒光顯微鏡和透射電鏡結果均顯示L1b能誘導HepG2細胞凋亡：流式細胞儀檢測出細胞周期停滯在G<,1>期和G<,2>期，G1期和G2期細胞百分含量分別由對照組的52﹪和0.3﹪上升到62