肥胖兒童外周血Obestatin、Ghrelin與胰島素抵抗的關(guān)系.pdf

1、研究背景：
　　 肥胖(obesity)是由于機(jī)體能量攝入長期超過人體的消耗，使體內(nèi)脂肪過度積聚，體重超過了一定范圍的一種慢性營養(yǎng)障礙性疾病。在全球呈流行趨勢，且低齡化趨勢日益明顯，全球?qū)W前兒童超重及肥胖的發(fā)生率已從1990年的4.2％上升至2010年的6.7％;我國兒童肥胖亦呈日益增長趨勢，2000年我國7～22歲漢族城市男生、城市女生、鄉(xiāng)村男生、鄉(xiāng)村女生肥胖檢出率分別為4.37％、2.32％、1.46％和0.92％，而到20

2、10年，城鄉(xiāng)男女生肥胖檢出率分別上升至13.33％、5.64％、7.83％、3.78％。其中單純性肥胖占兒童肥胖的95-97％，其發(fā)病與多種因素有關(guān)，如攝食過多、活動過少、遺傳因素、環(huán)境因素、出生體重、性別因素等。兒童肥胖不僅直接損傷兒童的心肺功能，而且可引起兒童嚴(yán)重的心理障礙、精神壓力和行為異常。兒童肥胖若不加干預(yù)，可發(fā)展為成人肥胖，并成為高血壓、糖尿病等慢性病明確的危險(xiǎn)因素之一。肥胖發(fā)生的年齡越早，肥胖的程度越高，發(fā)生有關(guān)疾病的危險(xiǎn)

3、越大。兒童早期是脂肪細(xì)胞生長的活躍期，也是生活方式最初的形成期，對于肥胖的發(fā)生和預(yù)防極為關(guān)鍵，肥胖兒童存在胰島素抵抗和高胰島素血癥，引起葡萄糖攝取、糖原合成增多;脂肪分解減少而合成增加、攝入增多;以及蛋白質(zhì)合成增多。同時(shí)胰島素抵抗加重了胰島β細(xì)胞負(fù)擔(dān)，因此肥胖兒童易患Ⅱ型糖尿病。
　　 胰島素抵抗(Insulin Resistance)是指正常血濃度的胰島素有效地促進(jìn)外周葡萄糖攝取、抑制肝糖輸出和抑制極低密度脂蛋白(Very L

4、ow Density Lipoprotein)輸出的能力受損。通過胰島素和血糖水平來證實(shí)，常用的為穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗（Homeostasis Model Assessment-Insulin Resistance）指數(shù)。一般認(rèn)為肥胖兒童存在不同程度的IR現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為高胰島素血癥。隨著對IR研究的不斷深入，肥胖與IR相關(guān)因素的探索已備受關(guān)注。目前的研究顯示，越來越多的脂肪細(xì)胞因子如瘦素、脂聯(lián)素、抵抗素、白細(xì)胞介素6等在肥胖及胰島素抵抗

5、中發(fā)揮重要的作用，同時(shí)胃腸肽obestatin、ghrelin等與肥胖及胰島素抵抗的關(guān)系也是關(guān)注的課題之一。
　　 Ghrelin（胃生長素）是1999年日本科學(xué)家Kojima等在小鼠和人胃內(nèi)分泌細(xì)胞及下丘腦弓狀核中新發(fā)現(xiàn)的，研究發(fā)現(xiàn)其是一個(gè)重要的食欲和體重調(diào)節(jié)激素，可通過促進(jìn)食欲，增加攝食量，以及影響物質(zhì)和能量代謝的各個(gè)方面，導(dǎo)致體重增加、脂肪積累和肥胖。動物實(shí)驗(yàn)亦顯示直接給予外源性ghrelin可以明顯增加大鼠或小鼠的攝食量

6、并導(dǎo)致肥胖。Asakawa等發(fā)現(xiàn)高脂飲食的狀態(tài)下，給予ghrelin的小鼠胰島素水平較對照組顯著升高，并且膽固醇水平也顯著升高，這提示ghrelin可能引起或加重胰島素抵抗及脂代謝紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致肥胖。流行病學(xué)研究顯示，低濃度ghrelin與胰島素抵抗、高血壓、Ⅱ型糖尿病密切相關(guān)。
　　 Obestatin（肥胖抑制素）是2005年zhang等從大鼠胃組織中分離純化了的一種活性肽并發(fā)現(xiàn)其也存在于血循環(huán)中，在嚙齒類動物實(shí)驗(yàn)中，腹腔或

7、腦室內(nèi)注射obestatin可抑制機(jī)體攝入食物、抑制體重增加，延長小鼠的胃排空時(shí)間、減少腸收縮頻率，抵消了ghrelin的促進(jìn)作用，有研究發(fā)現(xiàn)肥胖組空腹obestatin濃度顯著降低。糖耐量受損和非肥胖型Ⅱ型糖尿病者空腹obestatin血漿濃度明顯降低，且無性別差異，與胰島素抵抗有關(guān)?？崭狗逝忠种扑厮脚cBMI(BodyMass Index)和基礎(chǔ)胰島素水平呈負(fù)相關(guān)。
　　 目前在肥胖兒童外周血obestatin及ghreli

8、n濃度的改變及與胰島素抵抗的關(guān)系尚沒有太多的報(bào)道，有待進(jìn)一步廣泛研究，對obestatin及ghrelin的病理生理意義的研究，將有助于認(rèn)識糖尿病、胰島素抵抗和肥胖等疾病的新機(jī)制和探尋其防治的新措施。
　　 研究目的：
　　 通過檢測單純性肥胖兒童的血清ghrelin、obestatin濃度、ghrelin/obestatin比值及BMI、腰圍(WC)、腰臀比(WHR)、血脂、IR的水平并作相關(guān)性分析及多元逐步回歸分析，

9、以探討肥胖兒童ghrelin、obestatin、ghrelin/obestatin比值與胰島素抵抗、BMI、WC、WHR、血脂的關(guān)系。
　　 方法：
　　 1、對象選擇2011年1月-2012年12月在深圳市婦幼保健院兒科內(nèi)分泌門診就診的單純性肥胖兒童50例（肥胖組），其中男31例，女19例;年齡2.25～13.00歲，平均（8.10±3.13）歲。經(jīng)體格檢查、腹部B超、內(nèi)分泌、肝、腎功能等檢查，排除了其他內(nèi)分泌病、遺

10、傳代謝病及中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病引起的繼發(fā)性肥胖，身高在同年齡同性別組正常范圍內(nèi)。肥胖診斷標(biāo)準(zhǔn)為與成年人界值點(diǎn)接軌的中國2～18歲兒童超重、肥胖篩查BMI界值點(diǎn)法。
　　 另選擇同期在本院體檢健康的兒童30例為正常對照組，其中男14例，女16例;年齡2.50～12.83歲，平均（7.22±2.83）歲，經(jīng)體檢及實(shí)驗(yàn)室檢查排除肝、腎、肺、內(nèi)分泌等疾病及營養(yǎng)不良。兩組間年齡、性別無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2、體格指標(biāo)測量對所有研究對象

11、均記錄其性別、年齡，所有受試者于清晨8～9時(shí)空腹脫鞋帽，穿單衣，測量身高、體質(zhì)量、血壓、腰圍和臀圍等，計(jì)算其BMI=體重(Kg)/身高2(m2)、WHR=腰圍(cm)/臀圍(cm)。
　　 3、標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測受試者均隔夜禁食后于清晨8～9時(shí)空腹抽取靜脈血4ml，分離血清后立即上機(jī)檢測血清胰島素(FINS)、糖(FBG)、膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和A

12、LT、AST等。FINS采用全自動螢光免疫分析系統(tǒng)測定，F(xiàn)BG、TC、TG、HDLC、LDLC、ALT、AST采用全自動生化測定儀測定，以穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)公式計(jì)算IR值(IR=FINS×FBG/22.5)。余血清置于-70℃冰箱保存，血清obestatin及ghrelin濃度采用放射免疫法檢測，試劑盒由美國millipore公司提供，儀器為中核集團(tuán)西安核儀器廠生產(chǎn)的XH6020型全自動γ計(jì)數(shù)器，均由專人檢測。

13、r>　　 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0軟件，檢驗(yàn)數(shù)據(jù)是否呈正態(tài)分布，偏態(tài)分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)(P25，P75)表示，正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用(X)±S表示;HOME-IR為非正態(tài)分布，轉(zhuǎn)換為自然對數(shù)按照正態(tài)分布比較。兩組比較:正態(tài)分布采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)（由于大部分醫(yī)學(xué)生理指標(biāo)均為正態(tài)分布，本研究樣本量較小，雖然不滿足正態(tài)分布，腰圍、血脂、血糖亦均視為正態(tài)分布），偏態(tài)分布資料用秩和檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料組間比較用x2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用偏相

14、關(guān)分析，控制因素為年齡。多元相關(guān)分析采用多元逐步回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、單純性肥胖組及健康對照組的性別、年齡無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，x2/t=1.250、1.623，P=0.264、0.210;單純性肥胖組BMI、WC、WHR分別為24.17±3.70kg/m2，78.29±12.24cm，0.94±0.05，明顯高于健康對照組16.37±2.13 kg/m2，57.83±7.99

15、cm，0.87±0.06，t=11.960、9.040、5.490，P均＜0.001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、單純性肥胖組及健康對照組兒童空腹血糖分別為4.91±0.49mmol/L，5.09±0.79mmol/L，t=-1.122，P=0.268，無顯著性差異;單純性肥胖組FINS為116.24(61.57，150.66)pmol/L，Ln(IR)為3.08±0.66，明顯高于健康對照組的57.58(35.57，106.

16、74)pmol/L和2.53±0.76，Z/t=-3.399、3.43，P均=0.001;單純性肥胖組血TC、TG和LDL-C分別為3.97±0.90mmol/L、1.34±0.91 mmol/L，2.32±0.76mmol/L，明顯高于健康對照組的3.50±1.08mmol/L、0.99±0.53mmol/L和1.83±0.69mmol/L，t=2.187、2.148、2.886，P=0.032、0.035、0.005，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

17、義;兩組HDL-C無顯著差異，t=1.131，P=0.265。HOMA-IR值與BMI、WC、WHR、血TG呈正相關(guān)，r分別=0.390、0.337、0.223、0.405，P=0.000、0.000、0.039、0.000，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與TC、HDL-C、LDL-C無相關(guān)性。
　　 3、單純性肥胖組血清obestatin濃度為414.234±117.876 pg/L，明顯低于健康對照組485.109±140.498 pg

18、/L，t=-2.421，P=0.018，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血obestatin與FINS、HOMA-IR、ghrelin有顯著相關(guān)，r=-0.365，-0.336，0.401，P=0.001,0.002,0.000;與BMI、WC、WHR、TG、TC、HDL-C、LDL-C無相關(guān)性。
　　 4、單純性肥胖兒童血清ghrelin濃度為54.800(42.854，68.467)pg/L，明顯低于健康對照組兒童84.420(53.

19、840，141.293)pg/L，Z=-2.772，P=0.006，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血ghrelin與BMI、WC、WHR、HDL-C、Ln(IR)有顯著相關(guān)性，r=-0.260,-0.259,-0.256,-0.233,-0.311,P=0.021,0.021,0.023,0.039,0.005;而與WC、TG、TC、FINS、LDL-C無相關(guān)性。
　　 5、單純性肥胖兒童血清ghrelin/obestatin比值為0.

20、140(0.104，0.200)，健康對照組兒童為0.164(0.118，0.304)，Z=-1.958，P=0.05，差異無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血ghrelin/obestatin與BMI、WHR有顯著相關(guān)性，r=-0.292，-0.237，P=0.009，0.036;而與WC、WHR、TG、TC、HDL-C、LDL-C、Ln(IR)無相關(guān)性。
　　 6、多元逐步回歸分析顯示BMI為影響ghrelin最為顯著的因素，標(biāo)準(zhǔn)化回歸系數(shù)

21、為0.351，調(diào)整R2=0.112，回歸方程為ghrelin=178.586-4.561BMI。
　　 結(jié)論：
　　 1、單純性肥胖兒童存在胰島素抵抗現(xiàn)象;同時(shí)存在體質(zhì)量指數(shù)、腰圍、腰臀比和血脂紊亂，主要是血TC、TG、LDL-C升高。
　　 2、單純性肥胖兒童血obestatin、ghrelin均明顯降低，兩者呈正相關(guān)，且分別與FINS、Ln(IR)及BMI、WC、WHR、HDL-C、Ln(IR)相關(guān)。表明它們

22、與肥胖兒童胰島素抵抗和/或胰島素水平有關(guān)，可能在肥胖兒童胰島素水平、胰島素抵抗及肥胖的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的作用。
　　 3、單純性肥胖兒童胰島素抵抗與BMI、WC、WHR、血TG均呈正相關(guān)，與obestatin、ghrelin呈負(fù)相關(guān)?？刂艬MI、WC、血脂紊亂、提升obestatin、ghrelin水平，有利于控制肥胖胰島素抵抗的發(fā)生、發(fā)展。
　　 4、ghrelin/obestatin與WHR有顯著相關(guān)性，表明其與兒