固相萃取-光化學(xué)熒光-高效液相色譜法測定血漿中葉酸含量.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文固相萃取光化學(xué)熒光高效液相色譜法測定血漿中葉酸含量姓名：陳璇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：藥物分析指導(dǎo)教師：白小紅20050520山西醫(yī)科大學(xué)研士學(xué)位論文第一部分固相萃取一光化學(xué)熒光一高效液相色譜法測定血漿中葉酸含量摘要葉酸(folioacid)系由2氨基4羥基6甲基蝶呤、對氨基苯甲酸及谷氨酸組成的水溶性B族維生素，在人體內(nèi)轉(zhuǎn)化成四氫葉酸，參與氨基酸及核酸的合成。由于人體代謝過程極為復(fù)雜，葉酸生物樣品的分析測定尤為困難

2、，普通的測定方法難以對其進(jìn)行檢測。本文采用固相萃取法對葉酸血漿樣品進(jìn)行前處理，首次應(yīng)用大孔吸附樹脂作為萃取固定相，同時，還研究了葉酸的光化學(xué)行為，發(fā)現(xiàn)葉酸本身有弱熒光，在一定的反應(yīng)介質(zhì)中，經(jīng)光化學(xué)誘導(dǎo)，可產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光產(chǎn)物，從而明顯改善檢測靈敏度。同時，結(jié)合高效液相色譜技術(shù)，可進(jìn)一步提高分析方法的靈敏度和選擇性。目的建立一種靈敏度高、選擇性好的測定葉酸血漿樣品的分析方法。方法用LD605大孔吸附樹脂處理葉酸血漿樣品后，將其置于磷酸鹽緩沖

3、液(005molL～，pH54)中，經(jīng)紫外燈照射50分鐘，高效液相色譜分析：以C18柱作為固定相，甲醇磷酸鹽緩沖液(O05molL一，DH54)為流動相(V／V275：725)，流速：08mlminl，柱溫：25。C，在Z％=280nln和如=443nnl處進(jìn)行熒光檢測。結(jié)果葉酸血漿樣品的濃度在0100～1000ugml。范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好線性關(guān)系(F09988)，萃取回收率在802％以上，方法回收率不低于794％，日內(nèi)日問精密度