巖藻聚糖在化學(xué)污染及慢性腎功能不全伴不育小鼠模型附睪表達研究.pdf

1、腎臟病由于腎臟排泄、內(nèi)分泌、免疫及代謝等功能發(fā)生的一系列病理生理改變，使機體內(nèi)環(huán)境紊亂，最終導(dǎo)致其它器官發(fā)生病變。建立一個類似人體的動物腎臟病模型，有利于對腎臟疾病及其誘發(fā)疾病的研究。鎘作為橡膠制品、電池、香煙、肥料中的重要成分，是已知最易在體內(nèi)蓄積的環(huán)境毒物；研究表明，少量的鎘進入人體即可通過生物放大作用和生物積累，對動物器官特別是對生殖系統(tǒng)器官產(chǎn)生毒性作用。 本實驗首先探討建立兩個動物模型：一個是應(yīng)用氯化鎘模擬化學(xué)污染造成的

2、損害模型，另一個是應(yīng)用腺嘌呤模擬慢性腎功能不全的模型，從而比較附睪中的LeX、LeY糖蛋白正常狀態(tài)和這兩種模擬病態(tài)狀態(tài)下的分泌、表達有什么不同。 (一)化學(xué)污染小鼠模型及慢性腎功能不全伴隨不育小鼠模型制備通過小鼠死亡情況、體重變化情況、大體形態(tài)學(xué)、組織病理學(xué)方法檢測各項指標，對檢測結(jié)果綜合分析：選用C57雄性小鼠用氯化鎘制作化學(xué)污染小鼠模型通過檢測得出的結(jié)果是應(yīng)用1.5mg/kg劑量組制作模型符合實驗設(shè)計要求。選用昆明雄性小鼠，

3、用含0.4％腺嘌呤藥物飼養(yǎng)組、模型小劑量組(腺嘌呤300mg/kg)和模型大劑量組(腺嘌呤500mg/kg)，確定應(yīng)用0.4％藥物飼養(yǎng)制作的動物模型符合實驗設(shè)計要求。 (二)RT-PCR技術(shù)檢測氯化鎘組：LeX、LeY合成的關(guān)鍵酶基因FUT9和FUT1、FUT4在附睪頭、體、尾中的表達實驗組明顯低于對照組，說明氯化鎘抑制了LeX、LeY的合成。腺嘌呤組：FUT9和FUT1、FUT4在附睪頭、體、尾的表達實驗組高于正常組。腺嘌呤刺

4、激上調(diào)了LeX、LeY合成。 (三)免疫組化技術(shù)檢測結(jié)果氯化鎘化學(xué)污染模型組：在睪丸中，實驗組和對照組均未見LeX、LeY表達。在附睪頭部，實驗組LeX的表達主要在管腔少量分泌物中，對照組LeX陽性表達主要分布在管壁細胞；在附睪體、尾LeX的表達實驗組低于對照組。LeY的分布與表達強度和LeX相似。結(jié)果分析顯示，氯化鎘能使實驗組附睪的管壁細胞和管腔分泌物中LeX和LeY的表達都明顯降低。 腺嘌呤模擬慢性腎功能不全的模型組

5、：LeX在睪丸中未見陽性表達；在附睪頭部表達主要分布在管壁和管腔分泌物中，而對照組主要分布在管壁。實驗組LeX在附睪體、尾表達高于對照組。LeY在睪丸中各組均未見陽性表達；在附睪的頭、體、尾實驗組與對照組的LeY分布無差異，表達強度略高于對照組。 (四)Western-blot技術(shù)檢測結(jié)果氯化鎘組：實驗組的LeX和LeY蛋白在附睪頭、體、尾及睪丸中表達量與對照組相比明顯降低。 腺嘌呤組：附睪頭、體、尾及睪丸中均有LeX和