國人正常顱內(nèi)動(dòng)脈及顱內(nèi)動(dòng)脈瘤相關(guān)基因表達(dá)譜的初步研究.pdf

1、目的:1.建立正常顱內(nèi)動(dòng)脈的基因表達(dá)譜,為下一步研究顱內(nèi)動(dòng)脈相關(guān)性疾病的發(fā)病機(jī)制提供理論基礎(chǔ):2.探討胎兒顱內(nèi)動(dòng)脈與成人顱內(nèi)動(dòng)脈基因表達(dá)譜的差異,尋找與顱內(nèi)動(dòng)脈發(fā)育相關(guān)的基因,為研究顱內(nèi)動(dòng)脈發(fā)育障礙性疾病的病理機(jī)制提供理論依據(jù);3.應(yīng)用基因芯片技術(shù)分析顱內(nèi)動(dòng)脈瘤與正常顱內(nèi)動(dòng)脈基因表達(dá)譜之間的差異,從分子水平闡明顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的發(fā)病機(jī)制,為尋找顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的早期診斷和篩選提供可能的分子標(biāo)記物,同時(shí)為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的防治提供潛在的分子靶點(diǎn).方法:1.

2、收集3例意外死亡的中國正常成年男性顱內(nèi)Willis'動(dòng)脈環(huán)及主要分支,抽提動(dòng)脈組織中的總RNA,體外逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,反轉(zhuǎn)錄為生物素標(biāo)記的cRNA,片段化后與Affyrmetrix基因芯片公司的人類基因組芯片U133A雜交,掃描雜交信號(hào)并用專用分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析;2.收集3例意外流產(chǎn)的正常胎兒顱內(nèi)willis'動(dòng)脈環(huán)及主要分支,抽提組織中的總RNA,體外逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,反轉(zhuǎn)錄為生物素標(biāo)記的cRNA,片段化后與Affymetri

3、x公司的人類基因組芯片U133A雜交,掃描雜交信號(hào)并用專用分析軟件分析,同時(shí)將結(jié)果與正常成人顱內(nèi)動(dòng)脈基因表達(dá)譜進(jìn)行比較,找出差異表達(dá)的基因,同時(shí)隨機(jī)挑選3個(gè)基因用熒光定量RT-PCR對結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證;3.收集3例手術(shù)切除的顱內(nèi)動(dòng)脈瘤標(biāo)本,抽提組織中的總RNA,體外逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,反轉(zhuǎn)錄為生物素標(biāo)記的cRNA,片段化后與Affymetrix公司的人類基因組芯片U133A雜交,掃描雜交信號(hào)并用專用分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析,并將結(jié)果與正常成

4、人顱內(nèi)動(dòng)脈基因表達(dá)譜進(jìn)行比較,篩選出顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中差異表達(dá)的基因.結(jié)論:1.初步建立了中國正常成人顱內(nèi)動(dòng)脈組織的基因表達(dá)譜,該基因表達(dá)譜的建立為研究顱內(nèi)動(dòng)脈相關(guān)性疾病的發(fā)病機(jī)制奠定了基礎(chǔ);2.建立了人胎兒顱內(nèi)動(dòng)脈組織的基因表達(dá)譜,證明了顱內(nèi)動(dòng)脈的正常發(fā)育是由眾多基因共同調(diào)控的,研究這些基因的功能可能有助于認(rèn)清顱內(nèi)動(dòng)脈發(fā)育相關(guān)性疾病的發(fā)病機(jī)制.3.首次利用基因芯片技術(shù)對國人顱內(nèi)動(dòng)脈瘤組織中的差異表達(dá)基因進(jìn)行了大規(guī)模的分析,結(jié)果表明細(xì)胞凋亡異