果蠅X染色體腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因篩選及“長(zhǎng)期基因”功能初探.pdf

1、癌癥,目前已成為全世界主要的致命疾病之一,其中絕大部分患者最后死于腫瘤轉(zhuǎn)移,也即惡性腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散及在新組織生成腫瘤的過(guò)程.為更好地對(duì)癌癥患者進(jìn)行診斷和治療,當(dāng)務(wù)之急必須對(duì)腫瘤發(fā)育和腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)理作透徹的了解。然而,盡管目前全世界對(duì)此已進(jìn)行了大量研究工作,但由于腫瘤發(fā)育,尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程相當(dāng)復(fù)雜,故對(duì)其具體機(jī)制的了解尚不完整。為此,本文試圖利用一果蠅模型來(lái)尋找與對(duì)腫瘤發(fā)育和腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因。該模型中,我們通過(guò)遺傳學(xué)方法將致癌基因RasV

2、12與報(bào)告基因GFP特異性的過(guò)表達(dá)于眼、觸角原基嵌合體細(xì)胞中。以形成GFP標(biāo)記的良性腫瘤。我們通過(guò)觀察位于X染色體上的突變對(duì)該腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響,來(lái)尋找與該過(guò)程相關(guān)的基因。在總共3119個(gè)突變品系中,我們發(fā)現(xiàn)約占總數(shù)30％的果蠅突變品系改變了致癌基因RasV12導(dǎo)致的腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程.并且其中的23個(gè)突變品系促使該良性腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移。含有這些突變的RasV12腫瘤細(xì)胞不僅侵人鄰近的組織如腹側(cè)神經(jīng)索,且擴(kuò)散到果蠅的血淋巴系統(tǒng)中,并形成次生

3、腫瘤組織。通過(guò)對(duì)這些突變品系的遺傳定位,共發(fā)現(xiàn)4個(gè)新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因。我們對(duì)其中一編碼在鞘脂從頭合成途徑中起重要作用的二氫神經(jīng)酰胺合成酶的基因進(jìn)行了深入研究。該基因突變導(dǎo)致RasV12腫瘤細(xì)胞高度增殖并發(fā)生轉(zhuǎn)移。給該果蠅飼喂該合成酶下游產(chǎn)物神經(jīng)酰胺可以部分抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的表型。而其上游編碼絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶的基因突變可以造成類(lèi)似的RasV12腫瘤轉(zhuǎn)移表型。這些數(shù)據(jù)提示該腫瘤轉(zhuǎn)移表型可能是由神經(jīng)酰胺從頭合成途徑被阻斷造成的。我們通過(guò)進(jìn)一步