半導(dǎo)體激光和5-氟尿嘧啶緩釋植入劑對(duì)口腔腫瘤細(xì)胞抑制作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:口腔惡性腫瘤是世界上最常見的惡性腫瘤之一,占全身惡性腫瘤的5％左右,其中90%為上皮來(lái)源的鱗狀細(xì)胞癌,近年來(lái)口腔惡性腫瘤的發(fā)病率呈上升趨勢(shì),發(fā)病的年齡也趨于年輕化,因而探索口腔惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制進(jìn)而尋找積極有效的預(yù)防途徑成為一項(xiàng)十分迫切的重要任務(wù),有學(xué)者認(rèn)為實(shí)質(zhì)性腫瘤兩個(gè)主要特征之一是大量的新生血管形成,惡性腫瘤細(xì)胞通過(guò)新生的血管組織獲得必要的養(yǎng)分,帶去大量的新陳代謝產(chǎn)物,同時(shí)瘤細(xì)胞穿過(guò)新生的毛細(xì)血管經(jīng)由血路遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,血管生成源于

2、已存在的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后微靜脈的新的毛細(xì)血管性血管的生長(zhǎng),新生血管對(duì)于腫瘤的生長(zhǎng),浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移具有重要的意義,腫瘤只有具備了血管生成表型后才能惡性生長(zhǎng)和發(fā)生成功的轉(zhuǎn)移,血管的新生也是決定口腔惡性腫瘤生長(zhǎng)、分化、侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。
　　方法:選擇人口腔上皮細(xì)胞株KB細(xì)胞和人涎腺腺樣囊性癌(ACC-3)腫瘤的細(xì)胞,復(fù)蘇后予以培養(yǎng)在24盤培養(yǎng)孔中24小時(shí),隨機(jī)分為半導(dǎo)體激光照射組加5-Fu緩釋劑作用組和對(duì)照組,采用半導(dǎo)體激光照射加

3、入5-Fu緩釋植入劑的口腔腫瘤細(xì)胞,半導(dǎo)體激光照射組以輸出功能130mw連續(xù)照射30、60、120、180、240、300秒,照射之后細(xì)胞再培養(yǎng)24小時(shí),24小時(shí)后計(jì)算細(xì)胞數(shù)并用蛋白電泳分析。西方墨點(diǎn)法和免疫熒光染色法來(lái)觀察增生性細(xì)胞核抗原(ProliferatingcellNuclearantigen.PCNA)組蛋白,細(xì)胞角質(zhì)分子、微小管、SYnemin和Plectin等細(xì)胞增殖數(shù)量是以細(xì)胞數(shù)目的計(jì)算與PCNA、Histone的表現(xiàn)

4、評(píng)估,微小管、細(xì)胞角質(zhì)、Plectin和Synemins的表現(xiàn)則代表細(xì)胞骨架的穩(wěn)定性是否會(huì)受到半導(dǎo)體激光照射的影響。
　　結(jié)果:結(jié)果顯示腫瘤的細(xì)胞數(shù)目PCNA和Histone的表現(xiàn)均出現(xiàn)減少,顯示出人口腔上皮細(xì)胞株KB細(xì)胞和人涎腺腺樣囊性癌(ACC-3)腫瘤的細(xì)胞增生在實(shí)驗(yàn)中均受到抑制,對(duì)人口腔上皮細(xì)胞株KB細(xì)胞和人涎腺腺樣囊性癌(ACC-3)腫瘤的細(xì)胞影響最大的照射時(shí)間分別是90秒和120秒(能量密度分別是5.85J/cm2和7

5、.8J/cm2),在此劑量的照射下,人口腔上皮細(xì)胞株KB細(xì)胞和人涎腺腺樣囊性癌(ACC-3)腫瘤的細(xì)胞減少率分別為76%和66%,除此之外,實(shí)驗(yàn)中這些細(xì)胞的微小管和中間型結(jié)構(gòu)的完整性也受到破壞,中間型絲相關(guān)蛋白中Pleetin和Synemin的表現(xiàn)也被減少了。
　　結(jié)論:半導(dǎo)體激光和5-氟尿嘧啶緩釋植入劑會(huì)抑制人口腔上皮細(xì)胞株KB細(xì)胞和人涎腺腺樣囊性癌(ACC-3)腫瘤細(xì)胞的抑制效應(yīng),表現(xiàn)為兩個(gè)方面的效應(yīng):(1)抑制細(xì)胞有絲分裂,

6、使細(xì)胞增殖停止和減緩,導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)目減少,半導(dǎo)體激光和5-氟尿嘧啶緩釋植入劑抑制Histome的產(chǎn)生,使得DNA不能正常復(fù)制,因而降低了人口腔上皮細(xì)胞株KB細(xì)胞和人涎腺腺樣囊性癌(ACC-3)腫瘤細(xì)胞的增殖;(2)半導(dǎo)體激光和5-氟尿嘧啶緩釋植入劑通過(guò)影響細(xì)胞代謝或結(jié)構(gòu),加速細(xì)胞的死亡,這種抑制作用的機(jī)制可能是由于Plectin和Synemin等中間型絲相關(guān)蛋白的表現(xiàn)受半導(dǎo)體激光和5-氟尿嘧啶緩釋植入劑影響而下降,不足的Plectin和S