子癇前期胎盤床病理改變及MMP-2、TIMP-2和HIF-1α、vWF在其發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、妊娠期高血壓疾病是妊娠期特發(fā)性疾病，其中子癇前期是該疾病發(fā)生的常見類型，迄今為止仍為孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的重要原因之一。目前一致認(rèn)為子宮一胎盤缺血是其發(fā)病的重要原因之一，也是其重要的病理改變。目前認(rèn)為子宮一胎盤循環(huán)的有效建立與滋養(yǎng)細(xì)胞能否正常浸潤(rùn)胎盤床有關(guān)，但尚缺乏全面的直觀的比較研究。滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤(rùn)能力與MMPs和TIMPs的相關(guān)性研究頗多，其中關(guān)于MMP-2及其抑制劑TIMP-2的研究目前仍存在爭(zhēng)議。低氧時(shí)低氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-

2、1a)表達(dá)增高，研究表明HIF-1a還可通過多種途徑造成血管內(nèi)皮損傷，血管性假血友病性因子(vWF)可作為血管內(nèi)皮損傷的重要標(biāo)記物。滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)胎盤床不足、子宮-胎盤缺血缺氧是否有胎盤床。HIF-1a變化?胎盤床是否有血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷?血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的重要標(biāo)記物vWF在胎盤床中的表達(dá)如何?母體外周血vWF的水平是否與胎盤床vWF水平存在相關(guān)性?目前尚未見報(bào)道。 因此本實(shí)驗(yàn)選擇妊娠期高血壓疾病中子癇前期這一常見而重要類型作為研究

3、對(duì)象，從胎盤床入手，先從組織形態(tài)學(xué)上來探討子癇前期產(chǎn)婦胎盤床的改變，然后再比較子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床中MMP-2、TIMP-2以及HIF-1α的表達(dá)變化，以及胎盤床和母體外周血vWF濃度的變化。并探討它們?cè)谧影B前期發(fā)病機(jī)制中的作用。 第一章子癇前期胎盤床滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)及螺旋小動(dòng)脈變化的研究 目的：研究子癇前期胎盤床滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤(rùn)程度及螺旋動(dòng)脈的變化情況。為進(jìn)一步探討其發(fā)病機(jī)制提供組織形態(tài)學(xué)依據(jù)。 方法：選擇子

4、癇前期(輕度)組20例，子癇前期(重度)組20例作為研究組，正常妊娠產(chǎn)婦20例作為對(duì)照組。通過HE染色及免疫組織化學(xué)方法觀察胎盤床底蛻膜和子宮淺肌層中滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤(rùn)程度及螺旋動(dòng)脈及微血管密度的變化情況。 結(jié)論： 1.子癇前期產(chǎn)婦胎盤床存在滋養(yǎng)細(xì)胞淺浸潤(rùn)。 2.子癇前期產(chǎn)婦胎盤床滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)深度和密度的改變主要發(fā)生在子宮淺肌層中，且與其病情的嚴(yán)重程度相關(guān)。 3.子癇前期產(chǎn)婦胎盤床螺旋小動(dòng)脈的病理形態(tài)學(xué)改變，

5、主要發(fā)生在子宮淺肌層中且與滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤(rùn)深度和密度有關(guān)。 4.子癇前期產(chǎn)婦胎盤床MVD自底蛻膜開始減少，提示子癇前期胎盤床微血管發(fā)育受阻。 第二章子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床MMP-2、TIMP-2的變化及作用 目的：研究MMP-2及其抑制劑TIMP-2在子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床中的表達(dá)變化，并探討它們?cè)谧影B前期發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法：實(shí)驗(yàn)分組同第一章。比較三組產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床MMP-2、TIM

6、P-2水平的變化。采用胰蛋白酶消化法和percoll不連續(xù)密度梯度分離法純化滋養(yǎng)細(xì)胞；角蛋白染色法進(jìn)行滋養(yǎng)細(xì)胞鑒定；放射免疫法測(cè)定滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)上清液孕激素水平；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床MMP-2、TIMP-2蛋白的表達(dá)；RT-PCR方法檢測(cè)滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床MMP-2mRNA、TIMP-2mRNA的表達(dá)；明膠酶譜法檢測(cè)滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床MMP-2的活性。 結(jié)論： 1.子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床MMP-2mRNA、

7、蛋白表達(dá)下降、其活性降低；胎盤床TIMP-2mRNA、蛋白表達(dá)升高，可能是子癇前期發(fā)病的一個(gè)重要原因。 2．MMP-2可能主要由滋養(yǎng)細(xì)胞分泌，TIMP-2可能主要由胎盤床子宮蛻膜等細(xì)胞產(chǎn)生，共同作用參與子癇前期的發(fā)病。 第三章子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞與胎盤床HIF-1α蛋白的表達(dá)及胎盤床與母血vWF濃度的變化 目的：研究子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床HIF-1α蛋白的表達(dá)及胎盤床和母體外周血vWF濃度的變化，并探討它們

8、在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法：實(shí)驗(yàn)分組同第一章。采用免疫組織化學(xué)方法和Western-blot方法檢測(cè)滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床HIF-1α蛋白的表達(dá)；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)胎盤床勻漿液與母體外周血漿vWF的濃度。 結(jié)論： 1.子癇前期產(chǎn)婦滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤床HIF-1a蛋白表達(dá)升高，HIF-1a高表達(dá)可能參與子癇前期的病理過程，也可能是子癇前期血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的重要原因之一。 2．子癇前期產(chǎn)婦胎盤床勻