血小板糖蛋白受體Ⅱb-Ⅲa復(fù)合體基因多態(tài)性與冠心病關(guān)系的研究.pdf

1、背景: 冠心病(CHD)是多基因疾病,隨著人類基因組計(jì)劃的迅速發(fā)展,冠心病相關(guān)基因的定位和識(shí)別已成為研究的熱點(diǎn).病理研究觀察到冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊破裂,血小板聚集,血栓形成會(huì)造成冠心病不穩(wěn)定型心絞痛和心肌梗死的發(fā)生.血小板的聚集形成附壁血栓,血小板可釋放出許多細(xì)胞因子,進(jìn)入動(dòng)脈壁,對(duì)促發(fā)粥樣硬化病變中平滑肌細(xì)胞增生起重要作用.血小板性血栓形成由幾種血小板膜受體復(fù)合體調(diào)解,包括血小板糖蛋白(Gp)Ⅰb/Ⅰx,GpⅠa/Ⅱa和GpⅡb/

2、Ⅲa.GpⅡb-Ⅲa復(fù)合體是血小板表面纖維蛋白原的Ca2+依賴性受體,調(diào)解引起血小板聚集的纖維蛋白原依賴性共同通道.HPA-1a/b的多態(tài)現(xiàn)象是由GpⅢa的T→C的堿基替換所致Leu133(HPA-la,P1A1)→Pro(HPA-1b,PlA2)的多態(tài)性引起的.HPA-3(Baka/Bakb)是一種常見(jiàn)的Gp Ⅱb的多態(tài)現(xiàn)象,是由GpⅡb的重鏈靠近COOH一端的第843個(gè)位點(diǎn)發(fā)生由T→G的堿基替換所致.HPA-3a(Baka)在這個(gè)位

3、點(diǎn)的基因編碼Ile,而HPA-3b(Bakb)的等位基因編碼Ser.GPⅢa基因多態(tài)性PIal/a2在過(guò)去的研究中表明帶有PIa2基因型的人群急性冠脈疾病發(fā)生率較高.也有研究認(rèn)為在動(dòng)脈硬化性腦血栓形成中有GpⅡbIle/Ser843的基因多態(tài)性異常. 目的:探索GpⅡb-Ⅲa復(fù)合體的基因多態(tài)性在中國(guó)漢族人群中的分布及其與冠心病的發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系. 對(duì)象與方法: 一、研究對(duì)象 冠心病組:125例冠心病患者選

4、自浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院心內(nèi)科,符合世界衛(wèi)生組織(WHO)關(guān)于缺血性心臟病的命名及診斷標(biāo)準(zhǔn),所有患者經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影證實(shí).其中男性96例,女性29例,平均年齡63.7±9.6歲. 對(duì)照組:105例非冠心病組人群選自浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院心內(nèi)科冠狀動(dòng)脈造影陰性或未達(dá)到冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者.其中男性63例,女性42例,平均年齡59.7±11.0歲.本研究人群個(gè)體之間無(wú)血緣關(guān)系. 二、冠狀動(dòng)脈病變的評(píng)價(jià)冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)時(shí)

5、,以左前降支、左回旋支、右冠狀動(dòng)脈及主要分支中任何一支血管狹窄程度≥50﹪為陽(yáng)性.并根據(jù)累計(jì)支數(shù)定義為單支、雙支和三支病變,累及左主干記做雙支病變. 根據(jù)WHO關(guān)于心肌梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)將冠心病組分為心肌梗死組(86例)和非心肌梗死組(39例). 三、基因組DNA抽提和Gp Ⅱ b-Ⅲa復(fù)合體基因多態(tài)性檢測(cè) 1.白細(xì)胞基因組DNA抽提:酚/氯仿法提取外周血白細(xì)胞DNA. 2.GpⅡb-Ⅲa復(fù)合體基因多態(tài)性檢測(cè)

6、:采用PCR-RFLP技術(shù). 四、統(tǒng)計(jì)分析資料輸入,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.計(jì)量資料均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,組間均數(shù)間統(tǒng)計(jì)學(xué)差異用t檢驗(yàn),計(jì)量資料組間統(tǒng)計(jì)學(xué)差異用x<'2>檢驗(yàn).基因型和等位基因頻率采用直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì),組間比較采用x<'2>檢驗(yàn).對(duì)于偏態(tài)分布的資料進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后達(dá)到近似正態(tài)分布后于方差齊性后進(jìn)行單因素的方差檢驗(yàn).以P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著性. 結(jié)果: 1.浙江

7、地區(qū)漢族人群中存在GPⅡb基因多態(tài)性,未發(fā)現(xiàn)GPⅢa基因多態(tài)性.冠心病組和非冠心病組的GpⅡb基因型分布x<'2>值分別為0.130和1.611,p值均>0.05,符合Hardy-Weirlberg平衡. 2.所有樣本及冠心病組中GpⅡb基因多態(tài)性各基因型在冠心病危險(xiǎn)因子(性別、高血壓病、糖尿病)中的分布比較發(fā)現(xiàn)均無(wú)顯著性差異. 3.在冠心病組和非冠心病組中因GpⅡb基因多態(tài)性形成的aa、ab、bb三種組合基因型分布有顯

8、著性差異,冠心病組ab、bb基因型的分布較非冠心病組高.冠心病組b等位基因頻率顯著高于非冠心病組. 4.對(duì)冠心病組按冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)分組比較GpⅡb基因多態(tài)性,等位基因頻率有顯著性差異,病變支數(shù)越多b等位基因頻率越高,而各組間基因型分布無(wú)顯著性差異. 5.冠心病組按臨床類型分為心肌梗死組和非心肌梗死組比較GpⅡb基因多態(tài)性,兩組間基因型分布有顯著性差異,ab和bb基因型在心肌梗死組中的分布顯著高于非心肌梗死組;等位基因頻

9、率也有顯著性差異,心肌梗死組中b等位基因頻率顯著高于非心肌梗死組. 6.吸煙人群GpⅡb基因多態(tài)性與冠心病的發(fā)生無(wú)明顯相關(guān)性. 7.GpⅡb各基因型對(duì)血小板計(jì)數(shù)、血小板壓積、INR、APTT和FBG水平進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)均無(wú)顯著性差異. 結(jié)論: 1.浙江地區(qū)漢族人群中存在GPⅡb基因多態(tài)性. 2.b等位基因可能是冠心病發(fā)生發(fā)展的易感基因. 3.GpⅡb基因多態(tài)性可能與冠心病的病變支數(shù)、臨床類型