五龍顆粒對(duì)脾氣虛變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜肥大細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響.pdf

1、目的：變應(yīng)性鼻炎又稱過敏性鼻炎，為耳鼻喉科常見、多發(fā)病。導(dǎo)師熊大經(jīng)教授在其三十多年的臨床實(shí)踐基礎(chǔ)上，提煉出治療變應(yīng)性鼻炎的基本處方一一血龍顆粒，經(jīng)臨床驗(yàn)證，療效確切。本課題選用大鼠變應(yīng)性鼻炎模型進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探討該方對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜肥大細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用，并初步探討了中醫(yī)證型脾氣虛對(duì)變應(yīng)性鼻炎鼻粘膜肥大細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響，及本方對(duì)脾氣虛型變應(yīng)性鼻炎大鼠的作用。 方法：將84只健康sD大鼠隨機(jī)分為①空白組②脾氣虛AR組③

2、脾氣虛AR五龍顆粒組④脾氣虛AR息斯敏組⑤AR組⑥AR五龍顆粒組⑦AR息斯敏組。脾氣虛模型依據(jù)李德新采用飲食不節(jié)加游泳疲勞過度綜合因素傷脾的方法造模，AR模型按照安云芳報(bào)道的方法造模。各治療組在腹腔注射全身致敏造模結(jié)束后開始給藥，局部激發(fā)(同時(shí)予以藥物治療)期間除空白組外，脾氣虛AR組、AR組每日以含5％卵白蛋白的生理鹽水溶液半量激發(fā)，其余各治療組每同給藥1小時(shí)后再予以含5％卵白蛋白的生理鹽水溶液局部激發(fā)。從局部激發(fā)第一天開始，觀察動(dòng)物

3、一般情況變化，并在滴入卵白蛋白溶液30分鐘內(nèi)，著重觀察鼻部癥狀、鼻分泌量。用藥第七天時(shí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別在卵自蛋白激發(fā)后，觀察30分鐘，了解動(dòng)物AR發(fā)作情況。之后立即處死動(dòng)物。每組隨機(jī)選取6只大鼠，剝離上頜骨后立即用標(biāo)準(zhǔn)比色板測(cè)鼻中隔粘膜pH值；并摘取鼻中隔組織，觀察光鏡和電鏡下的病理形態(tài)變化，同時(shí)選用免疫組化法檢測(cè)鼻中隔粘膜P物質(zhì)(乳Substance P,SP )、雌激素受體陽性(Estradiol Receptor Positive

4、Cell，ER<'+>)細(xì)胞的表達(dá)。剩余6只大鼠在超凈工作臺(tái)上取出鼻粘膜，提取mRNA，并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，用RT-PCR法測(cè)定白細(xì)胞介素(Interleukin，IL)-2，3，10，12 mRNA的表達(dá)。分別在全身免疫結(jié)束后及處死動(dòng)物前，取血用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清組織胺的含量。 結(jié)果：五龍顆粒能明顯緩解變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻癢、噴嚏、清涕等癥狀；升高大鼠山于變應(yīng)性鼻炎降低的鼻分泌物pH值：下調(diào)大鼠由于變應(yīng)性鼻炎升高的血清組織胺含

5、量；減輕變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻中隔粘膜的炎性浸潤程度和嗜酸性粒細(xì)胞含量；調(diào)整鼻粘膜肥大細(xì)胞數(shù)目及功能至正常狀態(tài)：并通過下列途徑調(diào)節(jié)鼻粘膜肥大細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路：降低鼻粘膜SP表達(dá)，減少鼻粘膜ER<'+>細(xì)胞數(shù)目，增強(qiáng)鼻粘膜IL-2 mRNA表達(dá)，降低變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜IL-3mRNA表達(dá)，降低變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜IL-10mRNA表達(dá)，增強(qiáng)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜IL-12mRNA表達(dá);與變應(yīng)性鼻炎大鼠相比：脾氣虛變應(yīng)性鼻炎大鼠的臨床癥狀更嚴(yán)重，

6、組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)顯示病理改變更明顯，脾氣虛變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜肥大細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化主要表現(xiàn)在：鼻粘膜SP表達(dá)有進(jìn)一步增強(qiáng)的趨勢(shì)，鼻粘膜ER<'+>細(xì)胞數(shù)目沒有明顯變化，脾氣虛變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜IL-3mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)，鼻粘膜IL-12mRNA表達(dá)有進(jìn)一步下降的趨勢(shì)；除減輕局部炎性反應(yīng)、阻止局部嗜酸性粒細(xì)胞浸潤這兩方面外，五龍顆粒治療變應(yīng)性鼻炎大鼠的療效，無明顯優(yōu)于治療脾氣虛變應(yīng)性鼻炎大鼠的趨勢(shì)，二者相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。