內(nèi)毒素對(duì)大鼠腹腔肥大細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:取大鼠腹腔肥大細(xì)胞(PMC)進(jìn)行體外培養(yǎng),探討內(nèi)毒素對(duì)大鼠PMC脫顆粒的影響。 方法:取健康雄性Wistar大鼠36只,分離培養(yǎng)大鼠PMC,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)；臺(tái)盼藍(lán)染色觀察細(xì)胞活力；甲苯胺藍(lán)染色計(jì)算細(xì)胞純度。加入不同濃度內(nèi)毒素,將細(xì)胞分為5個(gè)組：①無(wú)LPS處理組：②0.5 μg/m1 LPS處理組；③1 μg/ml LPS處理組；④2 μg/ml LPS處理組；⑤4 μg/ml LPS處理組；置于37℃、5％CO

2、2培養(yǎng)箱培養(yǎng),2h后在倒置顯微鏡下再次觀察細(xì)胞的形態(tài)：臺(tái)盼藍(lán)染色觀察細(xì)胞活力；甲苯胺藍(lán)染色觀察細(xì)胞脫顆粒情況；熒光法測(cè)定上清液中組胺水平；專性底物α-N-苯甲酰-DL-精氨酸-P-硝基苯胺(BAPNA)法測(cè)定上清液中類胰蛋白酶水平；ELISA法檢測(cè)上清液中細(xì)胞因子IL-4、IL-10的濃度；放免法檢測(cè)上清液中細(xì)胞因子TNF-α的濃度。 結(jié)論:經(jīng)LPS處理后大鼠PMC脫顆粒明顯,釋放組胺、類胰蛋白酶及細(xì)胞因子IL-4、IL-10、

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