2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:圍生期腦損傷是導(dǎo)致新生兒死亡和兒童傷殘的重要原因。圍生期腦損傷的發(fā)病原因包括多個方面,其中窒息導(dǎo)致的腦缺氧缺血以及感染被認(rèn)為是最重要的原因,并且感染對缺氧缺血導(dǎo)致的腦損傷有增敏作用。N-乙酰半胱氨酸(NAC,N-acetylcysteine)具有抗氧化和抗炎癥的作用,在成年腦缺氧缺血動物模型上有神經(jīng)保護(hù)作用,對未成熟腦損傷的保護(hù)作用尚未見詳細(xì)報道。本研究將NAC應(yīng)用于已經(jīng)建立的內(nèi)毒素(LPS,lipopolysaccharide)

2、增敏新生大鼠缺氧缺血性(HI)腦損傷模型,探討NAC對未成熟腦腦損傷的影響和作用機(jī)制。 對象:8日齡Wistar大鼠98只,性別不拘,其中86只隨機(jī)分為3組:對照組(n=29)、小劑量(25mg/kg)(n=31)和大劑量(200mg/kg)(n=26)NAC治療組,HI后7天進(jìn)行腦組織病理學(xué)檢查,評價NAC對腦損傷程度的影響;另外12只隨機(jī)分為2組:對照組(n=6)和大劑量NAC治療組(n=6),HI后24h進(jìn)行腦組織勻漿,進(jìn)

3、行酶活性和蛋白印跡的檢測。 方法:1、LPS增敏的新生大鼠HI腦損傷動物模型制備:新生大鼠腹腔注射LPS(0.1mg/kg),3天后結(jié)扎左側(cè)頸總動脈并吸入濃度7.7%的氧氣40min。 2、給藥方法和藥物劑量:用于評價腦損傷程度的大鼠分別在應(yīng)用LPS后1h、HI前2h、HI后0h和24h腹腔注射生理鹽水或NAC(25mg/kg或200mg/kg),共4次。用于測定腦組織半胱天冬酶-3和胞襯蛋白者分別在應(yīng)用LPS后1h、H

4、I前2h、HI后0h腹腔注射生理鹽水或NAC(200mg/kg),共3次。 3、腦組織病理學(xué)檢查:HI后7天灌注后取出腦組織,固定后常規(guī)脫水、包埋,連續(xù)切片,進(jìn)行微管相關(guān)蛋白2(microtubule-associatedprotein2,MAP2)、髓鞘堿性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)和植物血凝素(1ectin)染色

5、。 4、半胱天冬酶-3和胞襯蛋白測定:HI24h后斷頭處死大鼠,大腦分左右半球進(jìn)行超聲勻漿,組織萃取液用于測定半胱天冬酶-3的活性、半胱天冬酶-3和胞襯蛋白蛋白印跡。 5、統(tǒng)計學(xué)處理:數(shù)值采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((-x)±s)表示,采用非配對t檢驗、Mann-WhitneyU檢驗或ANOVEPostHoc檢驗,用StatView軟件處理。 結(jié)果:1、LPS增敏的新生大鼠HI腦損傷包括皮層、海馬、丘腦和紋狀體等部位,大劑

6、量NAC治療組各部位的損傷均較對照組明顯減輕。 2、對照組腦梗塞體積和組織缺失體積分別為24.22±4.05mm3和88.26±10.16mm3,大劑量NAC治療組為5.26±1.60mm3和29.42±6.08mm3,大劑量NAC治療組較對照組損傷明顯減輕,小劑量NAC治療組與對照組相比無明顯差別。 3、對皮層下白質(zhì)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)對照組新生大鼠腦組織中出現(xiàn)髓鞘形成受阻,大劑量NAC治療組改變則較輕。 4、對照組新

7、生大鼠腦組織中星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多,大劑量NAC治療組陽性細(xì)胞數(shù)目較對照組明顯減少。 5、HI24h后半胱天冬酶-3的活性顯著升高,大劑量NAC治療后其活性較對照組顯著降低,蛋白印跡結(jié)果也提示17kDa的半胱天冬酶-3活性片斷在大劑量NAC治療組較對照組明顯減少。 6、胞襯蛋白蛋白印跡結(jié)果顯示HI24h后胞襯蛋白被鈣依賴蛋白酶(calpain和)半胱天冬酶-3降解,其150kDa和120kDa的兩個活性片斷在

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