N-乙酰半胱氨酸對大鼠肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實驗研究.pdf

1、目的:探討大鼠肝臟缺血再灌注損傷的過程和相關(guān)機(jī)制及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保護(hù)作用。 方法:將45只雄性SD大鼠隨機(jī)分成三組：①假手術(shù)組(Sham組，n=5)：僅行麻醉、開腹、游離肝周韌帶后取材；②缺血再灌注損傷組(I/R組，n=20)阻斷肝左、中葉入肝血流60min后分別再灌注1、3、6、12h；③NAC組(N組，n=20)：先自陰莖背靜脈給大鼠注射溶于生理鹽水的NAC，按300mg/kg

2、給藥，20min后再按I/R組處理。I/R組和NAC組在各規(guī)定的再灌注時間點，分別取下腔靜脈血2ml，切取肝左、中葉留作實驗指標(biāo)檢測。Sham組游離肝周韌帶后取材內(nèi)容同上述兩組。采用全自動生化分析儀測定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黃嘌呤氧化酶法和TBA法測定肝臟的超氧化物岐化酶(Superoxide d

3、ismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測肝組織中腫瘤壞死因子-α (Tumor necrosis factor-α，TNF-α)和細(xì)胞間黏附分子-1的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表達(dá)：采用western-blot方法測定肝組織中的NF-кB的表達(dá)；肝臟組織切片HE染色后，行光鏡檢查，觀察肝組織顯微結(jié)構(gòu)變化

4、。 結(jié)果: I/R組大鼠肝臟經(jīng)缺血60min，分別再灌注1、3、6、12h后，血清肝酶學(xué)指標(biāo)(AST、ALT)和肝臟的組織形態(tài)學(xué)都顯示較Sham組大鼠有明顯的肝臟損傷，其中以再灌注6h肝臟損傷最嚴(yán)重；肝組織MDA含量明顯高于Sham組(p<0.01)，于再灌注3h達(dá)到高峰：肝組織SOD活性明顯低于Sham組(p<0.01)，于再灌注6h降至最低值；肝組織中NF-кB的表達(dá)均明顯高于Sham組(p<0.01)，于再灌注3h達(dá)到高峰

5、：肝組織TNF-α和ICAM-1的表達(dá)均明顯高于Sham組(p<0.01)，且于再灌注6h達(dá)到高峰。NAC組再灌注1、3、6h與I/R組相同時間點比較：血清AST和ALT、肝組織MDA含量、NF-кB、TNF-α和ICAM-1的表達(dá)均低于I/R組(p<0.05)；肝組織SOD活性高于I/R組(p<0.05)。NAC組再灌注12h與I/R組相同時間點比較：上述指標(biāo)雖然在數(shù)值上有所減少或升高，但統(tǒng)計學(xué)上無差異(p>0．05)。 結(jié)論