芪丹通脈片對海馬缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及機制的實驗研究.pdf

1、本實驗即通過光化學(xué)法建立大鼠海馬梗死模型，然后給予藥物，觀察芪丹通脈片對實驗性大鼠海馬缺血性損傷后學(xué)習(xí)記憶的影響，觀察芪丹通脈片對缺血大鼠腦組織病理形態(tài)學(xué)及HSP70表達的影響，并對其腦保護機制進行了探討?！　⊙芯糠椒ê蛢?nèi)容： 1.動物模型的建立采用光化學(xué)法誘導(dǎo)大鼠海馬梗死模型，以70mg/kg體重的虎紅聯(lián)合冷光源進行雙側(cè)海馬照射，24h后觀察其組織病理學(xué)改變。 2.造模后大鼠行為學(xué)評估成年雄性SD大鼠84只，體質(zhì)量2

2、00±20g，隨機分為7組，每組12只，分別是空白對照組(control)、假手術(shù)組(sham-operatedgroup)、模型組(modelgroup)、QDTMH組(3.24g/kg.d)、QDTMM組(1.08g/kg.d)、QDTML組(0.36g/kg.d)、華佗再造丸組(HTZZ)。除空白對照組和假手術(shù)組外，其余各組大鼠均采用光化學(xué)法誘導(dǎo)大鼠雙側(cè)海馬梗死模型。造模后各組動物每日灌胃給藥。分別在大鼠造模前、造模后3d、5d、

3、7d，用Morris水迷宮觀測大鼠的平均逃避潛伏期，評價各組大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化。 3.標(biāo)本采集與處理行為學(xué)評估后，無菌條件下開胸，暴露心臟灌注固定。經(jīng)主動脈，先用生理鹽水100ml快速沖洗血液，再用4％多聚甲醛灌注固定兩小時。開顱取腦，標(biāo)本置于4℃下后固定。 4.缺血灶病理形態(tài)學(xué)觀察對標(biāo)本進行固定、脫水、包埋等處理，分別于光、電鏡下觀察形態(tài)改變。 5.HSP70免疫陽性細胞觀察按照說明書的操作順序進行AB

4、C免疫組化染色，鏡下觀察各組海馬及其周圍皮質(zhì)部位HSP70陽性細胞數(shù)。 實驗結(jié)果： 1.經(jīng)虎紅聯(lián)合冷光源照射，可誘導(dǎo)大鼠海馬梗死。術(shù)后大鼠表現(xiàn)為倦怠乏力、反應(yīng)遲鈍、舌質(zhì)絳紫暗淡，鼠毛干枯接穗，呈氣虛血瘀證表現(xiàn)。未見大鼠有明顯的肢體活動障礙。光鏡下觀察到缺血灶位于海馬區(qū)內(nèi)。梗死灶與周圍正常組織區(qū)別明顯，胞質(zhì)嗜伊紅性增強呈粉紅色。大鼠神經(jīng)行為學(xué)及病理形態(tài)學(xué)明顯為缺血性改變。 2.水迷宮結(jié)果提示，造模前各組大鼠平均逃避

5、潛伏期組間差異無顯著性意義。大鼠海馬梗死后較梗死前學(xué)習(xí)記憶能力下降(P＜0.01)；在造模后3d、5d、7d，QDTMT各給藥組大鼠平均逃避潛伏期較模型組明顯縮短，組間差異有顯著性意義(P＜0.05)。 3.光鏡下可觀察到明顯梗死灶，胞質(zhì)嗜伊紅性增強呈粉紅色，組織壞死脫落明顯。電鏡結(jié)果顯示，各組大鼠缺血部位神經(jīng)細胞超微結(jié)構(gòu)損傷程度不同。較之模型組，各中藥給藥組大鼠缺血后形態(tài)學(xué)損傷表現(xiàn)為不同程度的減輕。 4.HSP70免疫

6、組化染色結(jié)果表明，模型組陽性細胞表達最少，中藥治療組陽性細胞數(shù)表達較模型組增多(P＜0.01)，且各劑量組間比較有差別(P＜0.05)，QDTMTH組表達最多。假手術(shù)組未見表達。 研究結(jié)論與提示： 1.QDTMT能改善雙側(cè)海馬梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。 2.QDTMT能減輕大鼠海馬梗死的形態(tài)損傷程度，對局部缺血性腦損傷有一定的保護作用。 3.QDTMT能增強海馬梗死大鼠腦中HSP70的表達，可能是其腦保護作用