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文檔簡介
1、目的:通過電針督脈百會、大椎調(diào)節(jié)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF),觀察不同時(shí)相電針干預(yù)后海馬BDNFmRNA和BDNF蛋白表達(dá)及神經(jīng)干細(xì)胞(Neuronal stem cell, NSC)增殖的情況,結(jié)合學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)行為學(xué)觀察,探討電針通過BDNF對VD大鼠海馬神經(jīng)發(fā)生影響機(jī)制及BDNF、神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)增殖對學(xué)習(xí)記憶的影響機(jī)制,為電針治療VD提供理論依據(jù)。
2、 方法:對健康的SD雄性大鼠采用改良2-VO加尾靜脈放血法造成VD模型,隨機(jī)分為1W、2W、4W、6W模型及電針組,BrdU腹腔注射標(biāo)記神經(jīng)干細(xì)胞;采用針刺督脈腧穴百會、大椎,使用韓氏電針治療儀予15Hz連續(xù)波、1mA輸出電流,治療20min;利用Morris水迷宮觀察空間學(xué)習(xí)能力和記憶能力的變化情況;采用HE染色、RT-PCR及BDNF、BrdU免疫組織化學(xué)法分別觀察海馬組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化、海馬BDNF mRNA的表達(dá)、海馬BDNF
3、蛋白的表達(dá)情況及海馬齒狀回(DG)神經(jīng)發(fā)生的規(guī)律及電針治療后上述指標(biāo)的變化情況。
結(jié)果:⑴行為學(xué)檢測:電針組大鼠在不同時(shí)間段逃避潛伏期值均明顯高于模型組大鼠( P<0.05或P<0.01)。電針組大鼠之間平臺象限游泳時(shí)間占總運(yùn)動時(shí)間百分比沒有明顯差異,但與同時(shí)相模型組相比有差異( P<0.05或P<0.01)。⑵海馬組織形態(tài)學(xué)變化:通過對海馬組織進(jìn)行HE染色后觀察細(xì)胞形態(tài)發(fā)現(xiàn),電針組大鼠海馬齒狀回區(qū)較模型組結(jié)構(gòu)緊密,排列整齊,
4、層次豐富,且電針組海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)較模型組好。⑶電針對VD模型大鼠海馬BDNF基因及蛋白表達(dá)的影響:通過RT-PCR半定量檢測BDNF mRNA表達(dá)和BDNF免疫組化發(fā)現(xiàn)在不同時(shí)期海馬BDNF均有表達(dá),并且表達(dá)在2周組最高,4周組較高,同時(shí)相2周組和4周組電針組與模型組相比有差異(P<0.05或P<0.01)。⑷NSC的增殖情況:從統(tǒng)計(jì)結(jié)果看,同時(shí)相電針組和模型組相比,1W,2W電針組和模型組BrdU的陽性細(xì)胞數(shù)目有差異(P<0.05)
5、,但不管是電針組還是模型組隨著缺血時(shí)間的延長BrdU陽性細(xì)胞減少,其中組間比較,電針組4W、6W電針組與1W電針組BrdU的陽性細(xì)胞數(shù)目有差異(P<0.01),4W和6W模型組BrdU的陽性細(xì)胞數(shù)目與1W組相比有差異(P<0.01)。
結(jié)論:⑴電針能夠改善VD大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力;⑵電針能改善VD大鼠海馬組織形態(tài)學(xué)損傷;⑶電針能夠促進(jìn)VD大鼠海馬BDNF的表達(dá);⑷電針可促使海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖;⑸通過促進(jìn)海馬BDNF的表達(dá),使
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