6種苜蓿屬植物多倍體誘導(dǎo)及倍性鑒定研究.pdf

1、劉倩：6 種曹蓿屬植物多倍體誘導(dǎo)及倍性鑒定研究6 種苜蓿屬植物多倍體誘導(dǎo)及倍性鑒定研究研究生：劉倩指導(dǎo)教師：魏臻武教授( 揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院)摘要苜蓿屬( M e d i c a g o L i n n ．) 植物是廣泛分布于世界各地的優(yōu)良牧草來源，同時(shí)也是改良農(nóng)業(yè)生態(tài)的優(yōu)良植物。隨著近年來我國革產(chǎn)業(yè)的迅速崛起，對(duì)高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、高抗的優(yōu)良苜蓿需求迫切。倍性研究是苜蓿屬植物育種工作的基礎(chǔ)，也是研究苜蓿屬植物遺傳特性的理論指導(dǎo)。本文以

2、苜蓿屬植物紫花苜蓿( 四季旺) ( M s a t i v aC V ．S i r i v e r ) 、蒺藜苜蓿( 脫t r u n c a t u l a ) 、金花菜( 毖p o l y m o r p h a ) 、天藍(lán)苜蓿( 磁l u p u l i n a ) 、多葉型苜蓿( Ms a t i v aC V ．M u l t i f o l i a r )以及江蘇省地方品種淮陰苜蓿( M s a t i v aC V ．H

3、u a i y i n ) 為材料，通過不同濃度秋水仙素對(duì)各苜蓿屬植物種子進(jìn)行處理，建立秋水仙素誘變苜蓿屬植物多倍體技術(shù)體系，以獲得不同倍性水平苜蓿新種質(zhì)；并以四倍體紫花苜蓿為對(duì)照，對(duì)苜蓿加倍多倍體進(jìn)行了植物學(xué)及細(xì)胞學(xué)特征觀察。旨在為培育高產(chǎn)、多抗、優(yōu)質(zhì)的苜蓿新品種提供理論依據(jù)，且對(duì)苜蓿屬種質(zhì)資源遺傳多樣性研究具有重要意義。主要研究結(jié)果如下：( 1 ) 秋水仙素處理萌動(dòng)種子誘導(dǎo)后，萌發(fā)的幼芽發(fā)生明顯畸變：畸變幼芽的下胚軸發(fā)生扭曲，明顯增

4、粗成棒狀，且胚根生長(zhǎng)點(diǎn)受到嚴(yán)重抑制，胚根尖端膨大呈球形，大部分幼苗生長(zhǎng)停滯未能成苗而導(dǎo)致最終死亡；( 2 ) 單倍體苜蓿植株株高、分枝數(shù)、節(jié)間數(shù)、每枝葉片數(shù)均顯著低于四倍體對(duì)照植株( p < o ．0 5 ) ，葉面積約為四倍體植株的一半。田間篩選到的疑似八倍體苜蓿植株，其葉面積、株高、分枝數(shù)、每枝葉片數(shù)均顯著高于四倍體對(duì)照植株Q < o ．0 5 ) ，但節(jié)間數(shù)差異不顯著；( 3 ) 四倍體紫花苜蓿氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體數(shù)較二

5、倍體紫花苜蓿增加5 6 ．0 2 ％，差異顯著( p < o ．0 5 ) ，而疑似八倍體紫花苜蓿氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體數(shù)比四倍體植株增加了2 1 ．6 2 ％，差異顯著( p < 0 ．0 5 ) ；( 4 ) 用改進(jìn)的常規(guī)壓片法對(duì)苜蓿屬植物進(jìn)行根尖染色體計(jì)數(shù)，建立了適于苜蓿屬植物染色體制片的技術(shù)操作規(guī)程。經(jīng)染色體計(jì)數(shù)分析，供試的6 種苜蓿屬植物材料染色體數(shù)目分別為：紫花苜蓿( 四季旺) ( 2 n = 3 2 ) ，蒺藜苗蓿

6、( 2 n = 1 6 ) ，天藍(lán)苜蓿( 2 n = 1 6 ) ，而金花菜是染色體數(shù)目為1 4 的另一種二倍體苜蓿：此外，田間自然發(fā)生的單倍體染色體數(shù)目劉倩：6 種苜蓿屬植物多倍體誘導(dǎo)及倍性鑒定研究P o l y p l o i d y I n d u c t i o n a n d P l o i d y I d e n t i f i c a t i o no f6M e d i c a g o s p p ．G e r m p

7、l a s m sM ．S ．C a n d i d a t e ：L I U Q i a nA d v i s o r ：P r o f ．W E lZ h e n ．w uI I l l l l l l l l l I l l l I I l l I I IY 2 6 3 2 3 8 8( C o l l e g eo f A n i m a lS c i e n c ea n d T e c h n o l o g y , Y a

8、 n g z h o u U n i v e r s i t y )A b s t r a c tT h es p e c i e so fM e d i c a g og e n u s 肌w i d e l y c u l t i v a t e d a r o u n dt h ew o r l d a n da r et h em o s ti m p o r t a n t s o u r c eo f h i g hq u

9、a l i t yf o r a g e ，w h i c ha l s oh e l p i n gi m p r o v e t h ea g r o - e c o l o g i c a li s s u e s ．W i t ht h er a p i d d e v e l o p m e n t o f g r a s si n d u s t r y i nC h i n a , H i g h - y i e l d

10、，h i g h - q u a l i t y ，h i g hr e s i s t a n c ef o r a g e v a r i e t i e sa r e e x t r e m e l y d e m a n d e d ．P l o i d y r e s e a r c hi s t h e b a s i so f a l f a l f a b r e e d i n g p r o g r a m ，a n

11、 d t h et h e o r e t i c a l g u i d a n c eo f g e n e t i c c h a r a c t e r i s t i c ss t u d yo ng e n u s M e d i c a g o ．T h i s p a p e r t a k eM ．p o l y m o r p h a ，M ．1 u p u l i n a ，M ．t r u n c a t u l

12、 a G a c r t n ，M ．s a t i v aC V ．H u a i y i n ，M ．s a t i v a C V ．S i r i v e ra n d M s a t i v aC V ．M u l t i f o l i a ra sm a t e r i a l s ．W i t h d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f c o l c h i

13、c i n et r e a t i n go nt h e p l a n t s e e d s ，w e e s t a b l i s h t h e c o l c h i c i n e m u t a g e n e s i s p o l y p l o i dt e c h n o l o g y s y s t e m o fM e d i c a g o s p p ．t oo b t a i n t h e n

14、e w g e r m p l a s m sa td i f f e r e n t p l o i d y l e v e l ．T h e r e s u l t s a 代a s f o l l o w s ：( 1 ) A f t e rt h ei n d u c t i o no f c o l c h i e i n eo nt h eg e r m i n a t i n gs e e d s ，a p p a r e

15、 n t d i s t o r t i o n a p p e a r e do nt h e g e r m i n a t e dp l u m u l e s ：h y p o c o t y l sd i s t o r t e d ，a n d b e c a m er o d l i k e ，a n d t h er a d i c l eg r o w t hp o i n t sh a db e e ns e v e

16、 r e l ys u p p r e s s e d ，t h er a d i c l et i pg r e ws p h e r i c a l ，t h em a j o r i t yf a i l s t og r o w t op l a n t sa n d e v e n t u a l d e a d ；( 2 ) H a p l o i da l f a l hw a ss i g n i f i c a n t

17、 l y l o w e r t h a nt h et e t r a p l o i dp l a n t so nh e i g h t ，t h e b r a n c h e sn u m b e r , t h e i n t e m o d en u m b e ra n d t h e l e a v e sn u m b e r o n e a c hs t e m ( p S 0 ．0 5 ) ，t h el e a

18、 f a r e aw a s a b o u t h a l f o f t h et e t r a p l o i da l f a l f a ．T h es u s p e c t e do e t a p l o i da 】f a l f aw h i c hw a s f o u n d i nt h ef i e l dw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt

19、 h e t e t r a p l o i da l f a l f ao nl e a fa r e a , h e i g h t ．t h eb r a n c h e sn u m b e r , a n dt h el e a v e s n u m b e r o ne a c hs t e m ( p < o ．0 5 ) ，b u tt h ed i f f e r e n c eb e t w e e nt h

20、 ei n t e r n o d en u m b e r s w e r en o n ·s i g n i f i c a n t ；( 3 ) T h e n u m b e ro f s t o m a t a lg u a r d c e l lc h l o r o p l a s t so f t e t r a p l o i da l f a l f aw a s5 6 ．0 2 ％m o r et h a