健康人和老年性癡呆患者外周血抗Aβ抗體的分析及Aβ-,1-15-肽疫苗體液免疫反應(yīng)時效性研究.pdf

1、阿爾茨海默病(AD)是目前引起老年人癡呆的主要原因之一，本病病因不明，病理檢查有幾個特征：老年斑(SP)、神經(jīng)纖維纏結(jié)(NFT)和選擇性神經(jīng)元喪失。研究外周血中抗Aβ抗體在健康人和AD患者體內(nèi)的分布和性質(zhì)對了解AD的發(fā)病有一定的意義，國內(nèi)尚未見到相關(guān)的研究。由于Aβ42疫苗臨床試驗出現(xiàn)了腦膜腦炎的不良反應(yīng)，本文實驗室構(gòu)建了Aβ亞單位肽疫苗，在野生鼠，轉(zhuǎn)基因鼠和靈長類動物體內(nèi)成功地誘導(dǎo)出高水平的抗Aβ抗體，轉(zhuǎn)基因鼠表現(xiàn)出良好的預(yù)防和治療效

2、應(yīng)，并且完全避免了Aβ42疫苗出現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥的副作用。進(jìn)一步明確Aβ亞單位疫苗誘發(fā)體液免疫反應(yīng)的時程性將有助于了解Aβ亞單位疫苗的作用機(jī)制，確定疫苗的最佳劑量和治療時程。 材料和方法在本論文中包括了3個部分：第1部分選擇210例健康人的血清，從1歲到89歲，按10年為一個年齡組，用間接ELISA法測定外周血中抗Aβ抗體的相對滴度；并用Westernblot法測定抗Aβ抗體的特異性。第2部分定量檢測45例AD患者血清的抗A

3、β抗體，并用51例年齡匹配的健康老人作對照，比較兩組血中抗Aβ抗體的水平；再以兩組血清作一抗進(jìn)行免疫組化分析，觀察轉(zhuǎn)基因鼠Tg2576的腦切片中老年斑的顯示情況；最后根據(jù)抗Aβ抗體滴度的不同，將AD患者和健康老人的血清分為高、中、低3組，分別與PC12細(xì)胞培養(yǎng)，并用不同濃度的Aβ42進(jìn)行干預(yù)，用MTT法測定PC細(xì)胞的存活率，觀察兩組血清對PC12細(xì)胞的保護(hù)作用。第3部分選用C57BL小鼠，依據(jù)滴入Aβ15的量將小鼠分為50μg組、25μ