Aβ-,1-15-肽疫苗接種成年恒河猴的免疫效應及安全性研究.pdf

1、阿爾茨海默氏病(AD)是多發(fā)于老年人的一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，也是最常見的一種老年性癡呆。 本課題組利用多重肽抗原技術(shù)合成MAPs-Aβ1-15肽，配伍Th2型佐劑MF59，制備成Aβ1-15肽疫苗，免疫接種成年恒河猴，觀察其體液和細胞免疫學效應以及安全性，為Aβ1-15肽疫苗的臨床應用提供科學的實驗依據(jù)。 材料和方法1疫苗的制備及接種采用Fmoc固相合成方法合成Cys-Aβ1-15和七聚賴氨酸，經(jīng)高效液相色譜(HP

2、LC)純化到95％以上。通過交聯(lián)劑MBS將Cys-Aβ1-15和七聚賴氨酸耦聯(lián)，制成MAP-Aβ1-15，再經(jīng)HPLC純化到95％以上，進一步經(jīng)質(zhì)譜儀分析鑒定后收集分裝。佐劑MF59用Squalene、Tween80、Span85和雙蒸水按5：0.5：0.5：94(V：V)比例配制。用滅菌的0.01mol/LPBS(pH7.4)稀釋MAP-Aβ1-15和Aβ42，接種前將MAP-Aβ1-15、Aβ42與MF59按1：1(v：v)的比例混

3、合，用旋渦振蕩器混勻至乳化成功，即為接種用疫苗，MAP-Aβ1-15、Aβ42終濃度分別為200g/L?！　〗】敌坌院愫雍?0只，年齡5～8歲，體重6.5～10kg，隨機分為2組：Aβ1-15組和Aβ42組，每組各5只。于恒河猴的三角肌內(nèi)注射接種疫苗，每次每側(cè)各0.5mL。分別在第0、2、6、10、14、18、22、58周進行疫苗接種，共免疫接種8次。2Aβ1-15肽疫苗接種成年恒河猴的體液免疫效應觀察于接種疫苗前1周采血1次，每次接