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1、目的:獲得rhIL-15基因工程菌.方法:從肺癌細(xì)胞株A549中提取細(xì)胞總RNA、RT-PCR方法擴(kuò)增出編碼人IL-15成熟區(qū)基因的片段.該基因片段經(jīng)限制性內(nèi)切酶ECORⅠ、XhoⅠ雙酶切后,插入融合表達(dá)質(zhì)粒pGEX-4T-2的ECORⅠ、XhoⅠ酶切位點(diǎn),從而構(gòu)建成重組融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒.陽(yáng)性重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌BL21而得到工程菌.結(jié)果:重組成粒插入片段的核酸序列測(cè)定與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)IL-15蛋白成熟區(qū)核酸序列一致.該工程菌所表達(dá)融合
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