IL-15基因轉染人CIK細胞過繼轉移治療胃癌的實驗研究.pdf

1、本實驗構建了hIL-15-IRES-TK逆轉錄病毒載體，并證實可有效轉染CIK細胞。其轉染可使CIK細胞自分泌白介素-15(IL-15)。鑒于逆轉錄病毒轉染具有潛在的導致自身免疫疾病的危險，同時表達的胸苷激酶基因(HSV-TK)可使被轉染的CIK細胞在丙氧鳥苷(GCV)的處理下能被有效清除。這為hIL-15-TK病毒載體應用于臨床CIK細胞過繼轉移治療腫瘤的安全性提供了重要的基礎。
　　 為了觀察hIL15-IRES-TK質粒轉

2、染的人源T細胞在體內治療人源胃腸道腫瘤的療效，我們利用T細胞免疫缺陷小鼠(Balb/c-nu/nu鼠)以人的低分化胃腺癌細胞株BGC-823成功制備了人源胃癌細胞荷瘤小鼠模型，分別以hIL-15-IRES-TK逆轉錄病毒轉染和未轉染的CIK細胞在瘤體局部注射，1次/周，共2周，治療后觀察2周。以生理鹽水局部注射作為空白對照組。每周測量裸鼠腫瘤體積1次，4周后處死裸鼠，取出腫瘤組織稱重。
　　 經(jīng)過2周的治療，分別注射hIL-15

3、-IRES-TK質粒轉染與非轉染的CIK細胞的兩組荷瘤小鼠的腫瘤體積出現(xiàn)了顯著性差異，顯示出hIL-15-IRES—TK質粒轉染的CIK細胞比非轉染的CIK細胞有更強的抑制腫瘤增長的活性。在第3、4周，停止CIK治療后3組小鼠的腫瘤體積均有所增加，但hIL-15-IRES—TK質粒轉染與非轉染的CIK細胞組均小于生理鹽水組，說明CIK細胞過繼轉移治療具備一定的抑制腫瘤細胞的作用。而hIL-15-IRES—TK質粒轉染與非轉染的CIK細胞

4、兩組小鼠的腫瘤體積差異依然顯著，顯示出hIL-15-IRES—TK質粒轉染的CIK細胞比非轉染的CIK細胞抑制腫瘤增長的時效更長。
　　 在實驗過程中IL-15轉染CIK組開始治療后有兩只裸鼠腫瘤潰爛，第二周開始潰爛結疤，第四周潰爛愈合，腫瘤消失。對照組與CIK組則無此現(xiàn)象出現(xiàn)。這一現(xiàn)象也側面證實了IL-15-IRES-TK質粒轉染的CIK細胞比非轉染的CIK細胞具備更強和更持續(xù)的殺瘤效應。
　　 結論：實驗表明CIK細