小麥全蝕病拮抗菌的篩選及其抑菌活性成分的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了獲得針對小麥全蝕病的優(yōu)質生防資源,本研究以全蝕病菌GYY4-4為病原真菌靶標,采用平板對峙法,從155株細菌中篩選出FY1,KY1,KY2,LDJ11等4株具有明顯抑菌效果的拮抗菌株,他們的拮抗效率分別為:59.0%,53.8%,51.3%,60.9%,選取效果顯著的一株LDJ11作為出發(fā)菌株,對其進行鑒定和抑菌譜測定,結果表明該菌株為花域芽孢桿菌(Bacillusvallismortis),它對蘋果腐爛病菌(Valsacerate

2、rsperma),棉花紅腐病菌(Fusariummonihforme),辣椒枯萎病菌(Fusariumoxysporum),板栗炭疽病菌(ColletotrichumgloeosporioidesPenz),蘋果褐斑病菌(DiplocarponmaliHaradaetSawamura),小麥全蝕病菌(G.graminisVar.tritici),小麥紋枯病菌(Rhizoctoruasolani),小麥赤霉病菌(Fusariumgrami

3、nearum)等多種病原真菌表現(xiàn)出了明顯的拮抗活性,對小麥全蝕和板栗炭疽病菌的拮抗效果尤為顯著,其拮抗效果分別為60.9%和59.7%,并且在盆栽防效試驗中,菌株LDJ11對小麥全蝕病顯示出了良好的防治效果,其防治效果可達65.67%。顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),被菌株LDJ11抑制的全蝕病菌菌絲呈現(xiàn)畸形,頂端膨大,并有原生質外滲現(xiàn)象。
  對菌株LDJ11產生抑菌活性物質的培養(yǎng)基及條件進行優(yōu)化,確定了發(fā)酵的最佳碳氮源分別為葡萄糖和蛋白胨,

4、300ml三角瓶最佳裝液量為150mL~175mL,初始pH7.0,接種量2%,溫度37℃,轉速200r/min培養(yǎng)48h。
  采用飽和度為50%的硫酸銨沉淀和甲醇抽提相結合的方法對發(fā)酵液里的活性物質進行粗提,對分離出的活性物質進行性質研究發(fā)現(xiàn),所得到的活性物質具有對紫外照射,溫度,蛋白酶K,pH穩(wěn)定的特性,并將粗提物經HitrapQHP柱和C18柱分別進行陰離子交換層析和反相層析,將得到的活性成分通過HLP-MS進行檢測,鑒定

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